红霉素耐药肠球菌ermB基因和转座子Tn1545和Tn917的关系及质粒接合试验.pdfVIP

—-234—- 第三届全国细菌耐药监测与临床专题学术金邋 红霉紊耐药肠球菌ermB基因与转座子Tnl545和Tn917的 关系及质粒接合试验 吕萍徐樨薇 宋文琪甄景慧 俞桑洁扬永弘 沈叙庄 肠球菌为院内感染的重要病原菌[1]，它是仅次 子葡萄球菌的重要的院内感染致病菌。近几年， 2005年11月北京儿童医院门诊和住院患儿临床标 新生儿和儿童肠球菌败血症的发病率增加了6 本中分离的病原菌共158株，同一患者重复菌株选 倍[2]。随着抗生素的广泛应用，肠球菌的耐药情况 择首次分离菌，标本来源依次为尿液56．3％，血 日益严重，万古霉素耐药和多重耐药的肠球菌给 液19．o％，痰3．8％，分泌物12．O％．其他为 临床治疗带来极大困难[3]。在众多抗生素中肠球菌 对大环内酯类抗生素的耐药性一直居高不下，耐 株，鸟肠球菌(E．avium)2株，海氏肠球菌(E． 药机制主要与eYln和reef基因相关[．]，erm基因通 hirae)2株，分离株的鉴定采用常规方法和美国 常位于转座子Tnl545和Tn917内，耐大环内酯类 Phoenix 肺炎链球菌的ermB基因与转座子Tnl545和100全自动细菌鉴定系统。供体菌：粪肠 Tn917的相互关系已有报道[s3，但目前尚无耐大环 内酯类肠球菌ermB基因与转座子Tnl545和 Tn917的相互关系的报道。肠球菌耐药性和耐药 基因的传递是造成肠球菌耐药增加的主要原因。 Tn917除一株外，均为阳性，ermB基因的携带率 有研究报道，对动物和食物中分离的肠球菌耐药 性传递的研究更为广泛[6]，主要集中在四环素和万 古霉素耐药性传递，同时耐药性可以从粪肠球菌 转移到粪肠球菌【71；从粪肠球菌转移到李斯特 株外，均为阳性，ermB基因的携带率为94．1％ 菌[8]，也可从乳酸菌转移到粪肠球菌[9]，但尚无对 临床分离的肠球菌红霉素耐药性及耐药相关基因 可以在同种同属、同种异属和异种之间的细菌中 进行传递的报道。 本研究对儿童肠球菌大环内酯类抗生素的耐 受体菌：1株粪肠球菌其对红霉素敏感(MIC= 药性及其ernlB基因与转座子Tnl545和转座子 Tn917的相互关系进行探讨，通过研究红霉索耐 药肠球菌的质粒接合实验，证实肠球菌红霉素耐 药性和耐药基因在同种同属、同种异属和异种之 间细菌的传递。 基因、Tnl545和Tn917均为阴性。 2．仪器设备：全自动细菌鉴定系统为美国B 材料与方法 D公司Phoenix P’FC-100TM(MJ 一、材料 为上海复日科技有限公司产品，电泳仪为北京六 1．质控菌株：由卫生部临床检验中心提供， 一仪器厂生产。试剂：抗生素标准品：红霉素 包括粪肠球菌(ATCC29212)，金黄色葡萄球菌 作者单位t 100045首都医科大学附属北京儿童医院 定所提供。药敏用培养基(M_H琼脂)为英国 通讯作者t沈叙庄 Oxoid公司产品。PCR试剂和LadderMarker均由 第三届全国细菌耐药监测与临床专题：学术会议 一235一 赛百胜基因技术有限公司提供。BHI琼脂选择培 养基：红霉素／四环素选择培养基(红霉素256ug／延伸7min。PCR产物分析：l％琼脂糖凝胶电泳 ml，四环素64ug／m1)l红霉素选择培养基(红霉