gg2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

一、动物细胞融合 概念：又称为体细胞杂交。指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 1、单克隆抗体的概念 3、单克隆抗体的应用 ⑴作为体外诊断试剂 ⑵制成生物导弹，用于治疗疾病(如癌症) * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 原生 质体 融合 离心、 振动、 电刺激、 聚乙二醇 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 激素 筛选 植物细胞 等量 激素 再分化 植物体细胞杂交 原理： 结果： 细胞膜的流动性 得到杂交细胞 诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 （不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 离心、振动、电刺激； 聚乙二醇； 2、诱导融合的方法： 动物细胞融合 细胞核 病毒颗粒 细胞核 灭活的病毒颗粒黏附在细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿过 细胞膜连接 动物细胞融合 细胞融合，形成杂种细胞 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 生物：灭活的病毒 物理（离心、振动、电激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 浆细胞 记忆细胞 抗体 (二次应答) B细胞 抗原 吞噬细胞 T细胞 直接刺激 抗体的产生： 抗体的分布： 主要分布于血清中，也分布于组织液及外分泌液中。 二、单克隆抗体 背景知识回顾 浆细胞 记忆细胞 抗体 (二次应答) B细胞 抗原 吞噬细胞 T细胞 直接刺激 背景知识回顾 Ⅰ、B淋巴细胞受抗原刺激后，可产生抗体。 Ⅱ、每一种淋巴细胞只能产生一种抗体。 Ⅲ、动物体内有百万种B淋巴细胞，受刺激后可产生百万种的抗体。 解决方案： (1)从人体（动物体）内筛选单一效应B细胞，可产 生单一抗体，纯度高,但效应B细胞不能无限增殖 ,不能大量产生抗体； (2)骨髓瘤细胞可无限增殖,但不能产生抗体; 原始方法获得的抗体—— 特异性差，纯度低，反应不灵敏。 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 单克隆抗 体 细胞融合 单——单个细胞 克隆——无性繁殖 特点——灵敏度高、特异性强 由单个效应B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆)，形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的灵敏度高、特异性强的抗体。 1、单克隆抗体的概念 由单个效应B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆)，形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的灵敏度高、特异性强的抗体。 2 单克隆抗体制备过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体 注射抗原 体外培养 注射到小鼠腹腔 (体内培养) 融合后的细胞有几种? 五种: B BB B瘤 瘤瘤 瘤 用特定的选择培 养基进行筛选. (效应B细胞) 利用同位素标记的单克隆抗体，与某种抗原发生特异性结合，作为诊断依据。 其优点在于准确、高效、简易、快速。 生物导弹——是以能与肿瘤细胞结合的单克隆抗体作为“导向系统”即载体，以抗癌的物质，如化疗药物或同位素作为“弹头”制成。 其优点在于疗效高、毒副作用小。 “生物导弹”＝单克隆抗体＋药物 *