手性膦酸酯硫脲的抗TMV活性及作用机制研究.pdfVIP

第 40卷 第 1期 西 南 师 范 大 学 学 报 (自然科 学版) 2015年 1月 Vo1．40 No． 1 JournalofSouthwestChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition) Jan． 2015 手性膦酸酯硫脲 的抗 TMV活性及作用机制研究① 刘静姿 ， 胡俊锋 ， 史大斌。， 宋宝安。， 吴 剑。 1．贵阳医学院，贵阳 550004；2．遵义医学院，贵州 遵义 563000； 3．贵州大学 精细化工研究开发 中b／教育部绿色农药与生物工程重点实验室，贵阳 550025 摘要 ：采用半叶枯斑法 ，测定了手性膦酸酯硫脲化合物的抗烟草花叶病毒 (TMV)活性，化合物 I。和 I 在体积质 量分数为 500mg／L时对 TMV的治疗效率分别为 53．2％和 56．7％，接近或超过对照药剂宁南霉素 (治疗效率为 54．3 )；通过抗黄瓜花叶病毒 (CMV)活性筛选还发现 ，I。和 I 对 CMV 的治疗效率分别为 53．4 和 54．6 ， 接近对 照药宁南霉素 (56．3 )．在化合物 I。的作用下 ，研究 了烟草 叶片 中叶绿素质量分数和 3种防御酶 (PAL， POD和 SOD)活性的变化趋势，结果表明经化合物 I。处理后烟草植株体 内能产生与抗病机制相关的信号，从而启 动植株体 内一系列的抗病 因子 ，促进烟草体 内防御酶系产生 ，增强了植物 的系统抗病性而达到抗 TMV 的效果．同 时，通过分子对接考察 了化合物 I 和 I 作用于病毒大分子 TMV可能的活性靶标 ，说 明氢键在抗病毒活性 中发 挥重要的作用． 关 键 词 ：手性硫脲 ；膦酸酯 ；抗 TMV活性 ；作用机制 中图分类号 ：0626 文献标志码 ：A 文章编号 ：1000—5471(2015)1—0039—06 烟草花叶病毒 (TMV)是全世界烟草栽培地 区普遍发生的一类植物病害，直接导致烟叶质量严重下降 和烟草大幅度减产 ，造成全世界每年经济损失 10亿美元 以上 ，研究和防治 TMV一直是烟草优质生产栽培 中的重大难题．目前已经商品化的抗烟草花 叶病毒药剂大田防效在 30％～6O 之间，不能有效抑制植物病 毒所造成 的危害 ，因此迫切需要研究开发更加高效 、低毒 、对环境安全的抑制 TMV的新药剂uJ．硫脲类化 合物在农药和医药领域 内都具有广泛 的生物活性 ，如具有植物生长调节 、除草、杀菌 、抗病毒和抗癌等活 性 ]，且该类化合物还具有低残 留、药害小、对哺乳动物的急性毒性低等优点．另一方面 ，a一氨基膦酸酯 作为天然氨基酸的含磷类似物 ，与磷酰化氨基酸、多肽的水解 中间体在结构上具有相似性 ，其中的磷原子 具有四面体结构 ，与羧酸衍生物水解产生的中间体也十分相似 ，该类化合物也具有酶活性抑制、抗菌、抗 癌 、抗病毒等多种重要 的生物活性 ]．由此 ，这两类化合物的合成 和活性研究越来越受到人们的关 注．为了获得高效、低毒、环境安全 的抗 TMV药剂 ，笔者 以氨基酸为手性骨架 ，将 a一氨基膦酸酯引入到 硫脲结构 中合成了一系列手性膦酸酯硫脲类化合物 ，其结构通式如图 1，合成方法见文献[13]．采用半叶 枯斑法测定了该类化合物的抗 TMV活性 ，其 中化合物 I。和 I 抗 TMV活性较好 ，接近或超过对照药剂 宁南霉素．同时 ，通过抗黄瓜花叶病毒 (CMV)活性筛选还发现 ，化合物 工s和 工 也有较好 的抗 CMV活 性 ，接近对照药宁南霉素．为了研究该类化合物抗病毒作用机制 ，我们考察 了在化合物 工s作用下烟草叶片 中叶绿素质量分数和 3种防御酶 (PAL，POD和 SOD)活性的变化趋势 ，并通过分子对接考察化合物 Is和 工 作用于病毒大分子 TMV可能的活性靶标 ，结果表明氢键在抗病毒活性 中可能发挥重要的作用． ① 收稿 日期 ：2013—11—26 国家 自然科学基金项 目；贵州省科技厅项 目(黔科 J-e~j：[200712146号、黔科合 SY字 [2o12]31o3)；贵州省教育厅 基金项 目： 项 目(黔省专合字[2012189号)． 作者简介 ：刘静姿(1967一)，女 ，贵州遵义人 ，博士，教授 ，主要从事药物化学研究． 4O