脐带血细胞的神经分化和移植的研究进展.pdfVIP

201 1北京市神经外科年会 外伤、基础研究及其它 脐带血细胞的神经分化与移植的研究进展 范存刚，张庆俊，周景儒 北京大学人民医院神经外科； 北京100044 摘要：虽然20年前自20年前Nakahata等发现人脐血中含有丰富造血干细胞以来，脐血造 血干／祖细胞的研究取得了相当的进展，并已成为一个新的造血干细胞来源。近来研究表明， 脐血中的部分细胞在体外培养或体内移植后可分化为神经细胞，并可促进神经损伤动物的功 能恢复，本文将对脐血源神经细胞的研究进展进行探讨。 关键词：脐血；干细胞；分化；神经元 脐血是胎儿出生时脐带内及胎盘近胎JL倾,J血管内血液，是胎儿血液循环的一部分。研究 表明，脐血干／祖细胞含量丰富，占有核细胞的0．98％…，是造血、内皮、间充质和神经等多 种干／祖细胞的丰富来源乜一7’钔。与当前研究较多的神经移植物胚胎干细胞和神经干细胞相 比，因其来源丰富、采集方便、无伦理等障碍而引起国内外神经科学领域研究者的广泛兴趣。 1．人脐带血干／祖细胞的性质 按个体发育过程中所处的阶段不同，干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细 胞是一种具有发育全能性的细胞，可在未分化状态下无限增殖。与之相比，成体干细胞分化 潜能相对受限，多数成体干细胞只能分化为其起源组织的成熟细胞，增殖能力也较差。脐血 作为胎儿血液循环的一部分，既具有较为原始、多分化潜能和较强增殖能力的优点，又无形 成畸胎瘤的危险，成为组织工程和细胞移植的理想选择。 按分化潜能的大小，干细胞可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞二类。虽然尚 无脐血干细胞具有全能性的充分证据，但脐血细胞中造血和神经干细胞标志的共表达以及间 充质干细胞(MSC)的存在说明脐血中含有多能干细胞。多能干细胞的存在为脐血在造血、 血管、神经等多系统疾病中的应用奠定了基础。 从组织来源上，干细胞可分为造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞和内皮干／祖细 胞等。自20年前Nakahata等发现人脐血中含有丰富造血干细胞以来心1，脐血造血干／祖细 胞的研究取得了相当的进展，并已用于Fanconi’S贫血、白血病等多种血液系统疾病的治 疗。研究表明，脐血造血干细胞较骨髓中的更为原始、造血增殖潜能更强，因而是更好的造 具有成脂、成骨和神经等多向分化潜能。Lansdorpml等对脐血CD34+细胞进行培养得到了表 达CD31、CD54和CD62的贴壁细胞，说明其中存在内皮干／祖细胞。另外，对脐血细胞表型、 分化潜能及体内移植研究均表明脐血中含有神经干细胞。由此可见，脐血中富含造血、间充 质、神经及内皮等多种干／祖细胞，并具有良好的可塑性，在细胞移植中具有广泛的应用前 景。 171 2011北京市神经外科年会 外伤、基础研究及其它 2．体外培养的脐血细胞表达神经标志 目前普遍认为，巢蛋白(Nestin)是神经干细胞的标志，神经元特异性烯醇化酶(NSE)、 III型微 神经丝亚单位M(NF_M)、神经元特异核蛋白(NeuN)、微管相关蛋白一2(MAP一2)及13 管蛋白(TUJl)是神经元的标志，胶质纤维酸性蛋白(GFAP)为星形胶质细胞标志，少突胶 质细胞标志是半乳糖糖基鞘氨醇(GalC)，CD34、CDl33则是造血干细胞的标志。目前关于 新鲜分离的以及诱导后的脐血细胞向神经分化主要是靠细胞形态和这些神经标志物的表达 来鉴定的。 Sanchez—Ramos等蹭1首先报道了人脐血单个核细胞可表达神经标志。他们以全反式维甲 酸(胁)和神经生长因子(NGF)对脐血单个核细胞进行诱导分化，7天后诱导细胞的TUJl和 GFAP的表达量明显增加，有关神经细胞发育分化的基因上调，而血