刚果红与血清白蛋白相互作用的极谱分析.pdfVIP

维普资讯 第 22卷 第 4期 分析测试学报 v01．22 No．4 2003年 7月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrumentalAnalysis) Ju1．20o3 刚果红与血清 白蛋 白相互作用的极谱分析 郑石英，周 春，罗登柏 (中南民族大学 化学与生命科学学院，湖北 武汉 430074) 摘 要：在 pH4．7HAc—NaAc缓冲溶液中，刚果红与蛋白质 (BSA或 HSA)作用形成络合物 ，使刚果红一0．35 V(掰SCE)的还原峰电流下降，峰 电流的降低值同所加的BSA或HSA质量浓度在一定范围内呈线性关系； BSA和HSA的线性范围分别为0．5～12mg／L和0．5～11mg／L，检出限分别为0．25和0．20rag／L；运用该法测 定了人血清白蛋白样品，结果令人满意。 关键词：牛血清白蛋白；人血清白蛋白；刚果红 ；极谱法 中图分类号：0657．14；Q512．1 文献标识码：A 文章编号：1004—4957(2003)04一OO64—03 蛋 白质的定量测定是生物化学、药学、食品检验及临床分析中常涉及的重要 内容。在蛋 白质含 量的测定方法中，目前应用最多的是基于蛋 白质染色反应的光度法。偶氮染料与蛋 白质之间的染色 反应已有报道 ¨。。偶氮化合物具有极谱活性，偶氮染料 一蛋 白质络合物的极谱行为未见报道。作 者发现在醋酸盐缓冲溶液中，刚果红 (双偶氮染料)有一灵敏吸附还原波，加入蛋 白质后，该峰峰电 流下降。其下降值与所加的BSA或HSA质量浓度呈线性关系，可用于BSA或HSA含量的测定。方 法简便快速，灵敏度较高，用于人血清样品的分析，结果 良好。 1 实验部分 1。1 仪器与试剂 JP一303、JP一2型极谱分析仪 (成都仪器厂)，三电极系统 ：滴汞 电极为工作 电极 、饱和甘汞 电极 (SCE)为参比电极 、铂丝电极为对 电极；PXS一215型离子活度计(上海第二分析仪器厂)。 刚果红(上海试剂二厂)，5．0X10一mol／L；牛血清 白蛋 白(BSA，Sigma公司)，100mg／L，4oC冰 箱保存 ；人血清 白蛋 白(HSA，Signa公司)，100mg／L，4oC冰箱保存 ；HAc，1．0mol／L；NaAc，1．0 mol／L；使用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。 1。2 实验方法 在 10mL小烧杯 中，依次加入 1．5mLHAc、1．5mLNaAc、1．5mL刚果红和一定量的BSA或HSA， 加水稀至 10mL，以未加 BSA或 HSA的溶液作为空 白。 一0。1V为起始 电位，测定 一0．35V处一阶 导数波高(h)，计算Ah。 收稿 日期：2002—09—17；修回日期：2003—05—12 基金项 目：湖北省 自然科学基金资助项 目(991．063)；中南民族大学 自然科学基金资助项 目 作者简介 ：郑石英 (1977一)，女，湖南隆回人 ，硕士研究生 ；罗登柏，联系人 ． (1．ZhujiangHospital，FirstMilitaryMedicalUmversig，Guangzhou510282，China； 2．ChinaNationalAnalysisCenter，Guangzhou 510070，China) Abstmet：Essentialoilfrom RhizomaAtractylodisMacrocephalaewasextractedby supercriticalfluidextraction (SFE)andtheextractiveseparatedbymoleculardistillation(MD)． eextractionyieldof2．42％()andyield ofdistillde oilof26．3％( )wereobtainde ．卟econstituentsofextractiveanddistillde oilwereanalyze