微生物诱变育种方法地研究进展.pdfVIP

微生物诱变育种方法的研究进展 季宇彬 朱兴杰 徐昶儒 李文兰 【摘要】：本文综述了国内外微生物诱变育种领域的研究新进展，对生物学效应及诱 变微生物的机理进行了总结，并从物理诱变、化学诱变及复合诱变三个方面对微生物诱 变育种的研究进展进行了概述。 【关键词】：微生物；诱变育种；机制； 目前，微生物在解决人类的粮食、能源、健康、资源和环境保护等问题中正显露出 越来越重要且不可替代的独特作用。微生物育种的目的就是要人为地使某些代谢产物朝 人们所希望的方向加以引导，或者促使细胞内发生基因的重新组合优化遗传性状，获得 所需要的高产、优质和低能的菌种。为达到这一目的，必须对微生物作诱变处理。本文 对微生物诱变育种的物理、化学及复合方法进行了综述。 l物理诱变 物理诱变有紫外线、激光、微波、X射线、丫射线、伍射线、13射线和快中子等，其 中对微生物诱变效果较好、应用较广泛的有紫外线、微波、X射线和Y射线。 1．1紫外线 紫外诱变技术是诱变优良菌株的常规育种方法。由于其设备简单，诱变效率高，操 作安全简便等特点而被广泛应用。DNA和RNA的嘌呤和嘧啶有很强的紫外光吸收能 力，最大的吸收峰在260nm。紫外辐射能作用于DNA，因此在260nin的紫外辐射是最 有效的致死剂。紫外线被吸收后引起突变的原因，一般认为是：有的是DNA与蛋白质交 联【l】，有的是胞嘧啶与尿嘧啶之间的水合作用，有的是DNA分子内或分子间发生交联反 应，如使DNA分子中相邻的嘧啶碱基形成嘧啶二聚体，二聚体的出现会减弱双键间氢键 的作用，并引起双链结构扭曲变形，阻碍碱基间的正常配对，从而有可能引起突变或死 亡，同时二聚体的形成还会妨碍双链的解开，因而影响DNA的正常复制和转录，从而使 子代DNA形成缺口，碱基错误插入该缺口，造成新链的碱基序列与母链不同而引起突 作者简介t朱兴杰，男，研究生在读，研究方向：环境毒理学 通讯作者：汲晨锋，(E．mail)chnzhxj@163，com 1．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心，哈尔滨150076； 2．哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站，哈尔滨150076； 3抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心，黑龙江哈尔滨150076 ·496· 变。紫外辐射还可以引起转换、颠换、移码突变或缺失等【2】。其中形成嘧啶二聚体是产生 突变的主要原因，嘧啶二聚体不仅可以由单链上相邻的两个胸腺嘧啶反应后形成，也可 以由双链相应的两个胸腺嘧啶之间产生。此外，紫外诱变在核酸中往往造成比较单一的 损伤，所以在DNA的损伤与修复研究中也有～定的意义【31。 1．2微波 微波作为一种高频电磁波，能刺激水、蛋白质、核苷酸、脂肪和碳水化合物等极性 震动能引起摩擦，因此可以使得单孢子悬液内DNA分子间强烈摩擦，孢内DNA分子氢 键和碱基堆积化学力受损，使得DNA结构发生变化，从而发生遗传变异；微波具有传导 作用和极强的穿透力，在引起细胞壁分子间强烈震动和摩擦时，改变其通透性，使细胞 内含物迅速向胞外渗透【41。在试验中，究竟是微波辐射直接作用于微生物DNA引起变 异，还是其穿透力使细胞壁通透性增加，导致核质变换而引起突变，目前尚不明了，有 待进一步研究。 一般认为诱变致死率只与诱变剂量有关，而在微波诱变发现中孢子悬液水浴辐照处 理180s致死率达95％以上【51，由此认为致死率不仅受辐照剂量的影响，而且受瞬时强烈 热效应的影响，直接辐射处理时，微波引起分子间强烈震动和摩擦产生热能，导致微生 物在未接受到足够损伤造成突变的照射量之前，由于蛋白质变性，酶失活，孢子死亡， 致死率增大。这种瞬时强烈热效应的影响以被一些实验证明。 1．3X射线及Y射线等 X射线和丫射线都是高能电磁波，具有很强的穿透能力，只要强度适当可以使生物分 子发生电离，从而使生物体遭受破坏性损伤，直接或间接地改变DNA结构。其直接效应 是脱氧核酸的碱基发生氧化，或脱氧核糖的化学键和糖一磷酸相连接的化学健，DNA的 单链或双链键断裂。间接效应是电离辐射使水或有机分子产生自由基，这些自由基与细 胞中的溶质分子起作用，发生化学变化，作用于DNA分子而引起缺失和损伤。亚细胞结 构损伤引起酶的释放，代谢方向性和协调性的破坏促使原初损伤进一步扩展【6l。此外，电 离辐射还能引起染色体畸变，发生染色体断裂，形成染色体结构的缺失、易位和倒位 等。 2化学诱变 在微生物诱变中，有诱变作用的化学物质很多，主