人cystatin B 基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达.pdfVIP

安徽医科大学学报摇 粤糟贼葬 哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造蚤泽粤灶澡怎蚤摇 圆园员圆 粤责则；源苑（源） ·猿远员· 人 糟赠泽贼葬贼蚤 月基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达 耿慧武，刘摇 君，陈应炉，杨摇 军，刘晓颖，范礼斌 摘要摇 目的摇 用基因克隆方法构建带云蕴粤 鄄贼葬早 的人糟赠泽贼葬贼蚤灶 关键词摇 糟赠泽贼葬贼蚤灶 月；细胞定位；转染；免疫荧光 月真核表达载体，用其转染 悦韵杂鄄苑 和 匀耘运 圆怨猿 栽 细胞观察 中图分类号摇 砸猿源员；砸猿怨源援圆 糟赠泽贼葬贼蚤灶 月在增殖细胞内的定位；转染 匀耘运 圆怨猿 栽 细胞检测 文献标识码 粤 文章编号 员园园园原员源怨圆（圆园员圆）园源原园猿远员原园源 其表达。方法摇 设计带 云蕴粤 鄄贼葬早 的引物，以人糟赠泽贼葬贼蚤灶 月全 长糟阅晕粤序列的质粒为模板，孕悦砸法扩增 糟赠泽贼葬贼蚤灶 月全长序 摇 摇 半胱氨酸组织蛋白酶参与多种生理过程，包括 列，然后插入 责悦阅晕粤 猿 中构建 责悦阅晕粤 猿鄄糟赠泽贼葬贼蚤灶 月鄄云蕴粤 蛋白降解［员］ ［圆］ 、细胞凋亡 及免疫系统的发育和成 （悦杂栽月云）质粒；脂质体法转染至悦韵杂鄄苑、匀耘运圆怨猿 栽 细胞，荧 熟［猿］等。因此，体内的半胱氨酸组织蛋白酶的活性 光显微镜下观察其在细胞内定位；转染至匀耘运 圆怨猿 栽 细胞， 受到严格控制。糟赠泽贼葬贼蚤灶泽超家族就是内源性的半胱 提取细胞总蛋白进行宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼。结果摇 正确构建了责悦阅鄄 氨酸组织蛋白酶抑制剂之一。超家族成员之一的 晕粤猿鄄 糟赠泽贼葬贼蚤灶 月鄄云蕴粤 质粒；定位实验表明在悦韵杂鄄苑 和匀耘运 糟赠泽贼葬贼蚤灶 月（悦杂栽月）包含有怨愿 个氨基酸，分子量 员员 圆怨猿 栽细胞中，糟赠泽贼葬贼蚤灶 月 主要分布在细胞核内，核膜处更集 ［源］ 噪怎，能够抑制组织蛋白酶 月、匀 和 蕴 的活性 。 中，胞浆内也有广泛分布； 宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼结果表明该质粒能在 悦杂栽月功能的丧失导致哉灶增藻则则蚤糟澡贼鄄蕴怎灶凿遭燥则早（耘孕酝员） 细胞中有效表达。结论摇 该研究结果为了解糟赠泽贼葬贼蚤灶 月在细 ［缘］ 病，然而该病的发病机制尚未清楚 。为了揭示 胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。 悦杂栽月 的重要功能，构建了悦杂栽月 表达质粒，并对其 圆园员员原员圆原园员接收 在悦韵杂鄄苑 和匀耘运圆怨猿 栽 两种细胞内的定位与表达 基金项目：安徽省教育厅自然科学重点科研项 目（编号： 进行了初步研究。 运允圆园员园粤员愿苑 ）；安徽省自然科学基金（编号： 员摇 材料与方法 员员园源园远园远酝员苑园，员员园源园远园远酝员远源） 作者单位：安徽医科大学生命科学学院生物学教研室，合肥摇 圆猿园园猿圆 员援员摇 质粒、菌株和细胞摇 责悦阅晕粤 猿（陨灶增蚤贼则燥早藻灶 公 作者简介：耿慧武，男，硕士研究生；