血小板常温保存地研究进展.pdfVIP

血小板常温保存的研究进展 李振奇 马印图(解放军白求恩国际和平医院，石家庄，050082) 国内外常规保存血小板均局限于22℃震荡条件下，而冰冻保存则需要一80。C，这些都需电力和冰 箱等设备条件维持，遥∞多年来，虽然盎小板的分离稻保存方法骞了较大改进，毽仍右一些赡以克服 的缺点，尤其是保存期短，供应短缺经常发生。随着输血医学的发展，常规的血小板保存方法不能满 足现代战争和突发事件所致伤员快速输血救治的需要，对保存质量提出了更高的要求，为此发明了多 耪新的保存方法，也研发了很多代用品，血小板代用麓鹭裁处予实验阶段裁临床翦研究酸段。如何提 高常温条件下的血小板保存质量，对战时伤员输血救治具有重要的战略和现实意义，也是发达国家输 血界一直研究的重要课题。 1．血小板离体后的保存损害 血小板极其脆弱，在外周血循环中寿命仅为8—10d，离体后易发生变形和破坏，影响输后体内存 活率，保存损害主要是豫存技术在方法学上的局限性所造成的。塞小板遇冷后发生形态上酶改变，由 盘状变成球状，容易聚集和破坏。保存期间的pH值下降与乳酸浓度有关，而乳酸浓度的升高又与贮 血容器对气体的通透性有关。保存斑小板的主要目的赵保证其生理功能以及输注后的临床疗效，包括 盎夺板的超徽结构、盎小板酌聚集功能、粘附功能、斑块收缩试验、分泌功能、膜表面促凝斑活性的 功能等。血小板输注的临床疗效包括输注后的止血情况及保存后血小板的回收率、输后血小板增高指 数等川。 2．血小檄常温保存 血小板的常温保存方式有二种，冷冻聪干燥保存鞫22℃液态保存。22℃液态保存优于4℃是在 板，随时间延长，浓缩m小板血浆中IL—lB、IL一6、IL一8和俐F—a浓度逐渐上升，这些细胞因子 由残馨的自细胞分泌，褥导致菲溶血性发热反应【2】，温度和一值是影响瞧小板保菇效果极其重要的 因素，贮血容器对气体的通透往也很重要}3j。同时，22℃保存斑小板必须保持轻度持续振荡，这样可 使02和C02容易通过容器表面，有利于保存期pH值的维持。但是，由于部分活性的丧失和微生物的 污染，摄据美霪药品监餐管理蜀栽定常温最多只能保存5天，僮溢振荡条韩下最多力7d，极大地限制 了临床应用，甚至造成浪费。如何最大限度地保护血小板的活力、提高存活率及延长贮存期限，对于 血小板输注意义很大。多年来人们一直致力于延长血小板保存期的研究，取得了一定的成果【4芦】，目 蓠，国岁}一释凝的盘小摄保护荆一Thro抵l，它是巍小板第2信使诱节剂混合耪，逶避霹逆缝作用于 特异的活化通路抑制血小板体外激活、稳定皿小板细胞内生化、防止血小板保存损伤．可提高血小板 的体内外功能和活性L6】，顾海慧等o¨对Thrombosol的作用机制、功能方面的研究进展进行了综述。 筠整纪5G年代中期，大靛致力于盥夺板冻干保存盼骈究，冷冻干燥纛小板是将魏入保护剂豹盎夺 板在一30℃条件下冷冻干燥，以固态形式储存在常温下的一种皿小板保存方式，有关皿小板冰冻保存 研究的报告始乎1956年，Klein医生尝试了将血小板冰冻干燥后，混于搬浆中于一15℃保存的方法， ·196· 并且通过临床观察发现，患者输注复苏后的血小板有很短的止血效果。但由于其止血效果差而停止了 这方面的研究。直到70年代末80年代初，Read等¨，1发展了这项技术，并利用固定后冻干血小板具 有vWF受体活性的特点对人和动物血浆中的vWF进行检测，从此，对冻干血小板的研究又焕发出新的 生机。1995年，他们采用1．8％多聚甲醛稳定血小板。洗涤后悬浮于5％白蛋白柠檬酸缓冲液中，在 一20℃—一40℃条件下冻干24h，然后保存在一80℃低温冰箱中，冻干血小板用咪唑缓冲液再水化， 这种再水化冻干血小板在电镜观察下表现出正常的形态，利用流式细胞术测定表面受体表达与正常血 小板相似，在狗、鼠止血时间延长模型输注实验中，证明冻干血小板有修复止血时间的作用，另外， 用1．8％多聚甲醛处理血小板能有效地除去细菌和病毒。在接下来的研究中，他们对冻干人血小板的 活化和粘附进行了测定u引，同时，Barry等利用葡萄糖孵育血小板后进行冻干，在最理想的条件下获 在血小板的冻干保存体系中添加了海藻糖，使得冻干血小板再水化后达到了85％的存活率，同时再水 化冻干血小板对凝血酶、胶原蛋白、ADP和瑞斯托菌素的反应与新鲜血小板几乎完全相同，通过傅立 叶变换红外光谱学分析表明，这种再水化冻干血小板的膜以及膜蛋白成分与新鲜血小板极其相似。该 项研究还观察了血小板膜完整性和蛋白二级结构，结果显示负载海藻糖的冻干血小板水化后蛋白二级