鸭乙型肝炎病毒和其在抗乙型肝炎病毒药物研发中的应用研究.pdf

大会发言 时，血中以DBIL为主，提示阴黄证肝内毛细血管炎症以及胆管阻塞情况较阳黄组严重【12】．阳黄组TBIL， DBI／IBI值低，说明阳黄组处理胆红素的能力较阴黄组高．提示阳黄病情轻浅，病程较短，预后较好．阴 黄属于黄疸中后期，病情重，病程长，预后不佳． 其它两组也有显著性差异，P0．01．阴黄组TP、A，A／G明显低于正常值，说明肝脏合成功能降低，正气 已衰，病情较重．而阳黄组及无黄疸组在正絮值范围，肝脏合成功能尚在代偿范围，正气未虚，病情相对 较轻．临床上重型肝炎属阳黄证者也可以见到11P．A、A／G明显降低，提示热毒炽盛，正气已衰，肝脏功 能减退，预后凶险． 总之，阴黄患者肝组织损伤重，病程长，正气已衰，病情重． 鸭乙型肝炎病毒及其在抗乙型肝炎病毒药物研发中的应用研究 张奉学1，陈纪军2，杨湛3，王新华1，朱宇同1。邹移海o，李向阳1。何金洋1， 刘妮1，周红熬-。董伯振1，徐培平1。邓学龙t，李常青o，谈博1，赵畸1 (1广州中医药大学热带医学研究所，2中国科学院昆明植物研究所，3广j}H市第八人民医院 研究背景与意义 乙型肝炎病毒由于其传染性、慢性携带性，及其易引起肝硬化、肝癌等严重并发症而成为现在临床研 究的重点疾病之一．由于乙型肝炎病毒(HBV)感染已成为全球面临的严重公共健康问题之一，因此研究HBV 感染机制及其致病的分子机理，寻找有效的防治方法极为迫切．随着病毒学、分子生物学及免疫学等相关 学科的发展，国内外应用嗜肝病毒感染相关宿主的动物模型开展了有关乙肝感染机制、机体免疫、抗病毒 药物等方面的研究，取得了一些成效． B 鸭乙型肝炎病毒(duckhepatitis 型肝炎病毒类似．鸭乙型肝炎病毒病毒颗粒为球型，有囊膜，直径40—50nm，经卵垂直传播．所以雏鸭 感染率最高，感染后无临床症状，但有报道认为其感染可引起肝细胞变性和点灶状坏死，汇管区炎性细胞 浸润等肝炎样病理改． 细胞，也可体内感染雏鸭，被广泛用于研究嗜肝DNA病毒的复制机制．例如，嗜肝DNA病毒的逆转录复制 closedcircular 过程，共价闭环DNA(covalently 合酶的体外表达以及病毒核心颗粒装配的分子机制等重要发现，都是首先在DHBV的研究中获得的，并为 其它哺乳动物嗜肝DNA病毒的研究所证实． DHBV模型是一种用于评估I临床前期抗病毒药物如核酸类似物、反义寡聚核苷酸等治疗效果的良好 模型．深入研究DHNB对揭示HBV致病机制，乙型肝炎防治和抗HBV药物研发有着重要意义． 1建立了先天性和后天性感染鸭乙肝模型并分析了各自特点 通过建立先天性感染鸭乙型肝炎动物模型，从而来探讨不同鸭种DHBV的感染率，及影响DHBV水 平的因素，并通过该模型筛选有效的抗乙肝病毒药物． 后天感染鸭：上海鸭DHBV阳性传代血清．广州绿头鸭购回后。当天于胫静脉注射阳性病毒血清0．2ml／ 只，于第2天分别于胫静脉采血(0．5ml／只)，分离血清用斑点杂交方法检测． 先天感染鸭：广州绿头鸭购回后，于第2天分别于胫静脉采血(0．5ml／只)，分离血清用斑点杂交方法 检测；保留先天感染DHBV阳性鸭子实验，同时将先天和后天性感染的鸭子进行比较研究． 结果表明：先天性感染的广州绿头鸭血中病毒水平相对较高，到了27天时开始下降到一低水平，观察 到第72天还可以维持较高水平．而出生后第1天感染上海绿头鸭DHBV毒株的广州绿头鸭在第10天时血中开 水平．从以上可以看出：二者仍为乙型肝炎的动物模型，先天性感染的广州石井绿头鸭的内外周血中的 世界中联第四届肝病国际学术大会暨海峡两岸中医肝病研讨会 DHBV-DNA水平较高，波动不大，持续时间较长，适宜的给药时间也就相对较长，先天性感染绿头鸭由于 带毒时间较后天感染绿头鸭长，且DHBV-DNA水平较之稳定，因而用于抗乙肝药物的筛选可靠性更强． 鸭种的选择涉及两个问题：①所用鸭种对实验感染是否易感，感染后病毒动态是否稳定，持续时间如 何。②为保证不同组别的基线特征(baseline)及实验结果的可靠性和稳定性，在进行人工感染雏鸭时，尽量 选择那些自然感染率低的鸭种和鸭群，而且在纳入实验之前排除已经感染病毒的雏鸭，这是很有必要的． 受体鸭龄最好是l一3日龄雏鸭，以其免疫系统尚未