云南省油菜转基因的研究进展.pdfVIP

中国油料作物学报 2013年10月 Oil Sciences Chinese of JournalCrop 云南省油菜转基因研究进展 赵凯琴，李劲峰，王敬乔，罗延青，陈 苇’ (云南省农业科学院经济作物研究所，云南昆明，650205) 摘要：随着分子生物技术研究的快速发展，油菜的遗传转化研究日趋成熟。综述了云南省油菜科研团队近年 来在油菜转基因受体和转化技术，油菜生理特性改良的遗传转化，抗虫、抗病、品质改良、杂种优势利用等方面的一 些研究成果，对云南省农业科学院经济作物研究所油菜研究开发中心正在进行的部分转基因工作也进行了概述。 并提出了今后开展此项工作的设想和建议。 关键词：油菜；转基因；研究进展；云南省 油菜是中国主要的油料作物和促进农民增收的 力强、取材方便、转化简便、快捷等优点，被广泛利 重要经济作物，也是云南省冬季农业开发的优势产 用。在具体转化过程中，外植体的缩小是一个重要 业。在油菜育种和品种改良中，利用常规育种技术 的步骤。第一，它有利于增加外植体外表面受侵染 来改良油菜作物品种虽然取得了一定的成功¨j，但 细胞占外植体细胞总数的比值，有利于农杆菌的侵 同时还存在着一些问题，如选育年限过长，远缘杂交 染；第二，它有利于受侵染细胞少受未侵染细胞的影 不亲和以及亲本材料缺乏等。20世纪70年代以响而更为独立地扩增、繁殖，从而有利于转化细胞与 来，植物基因工程技术的发展，也为油菜品种的培育 组织的再生。云南省农业科学院陈苇等用25℃暗 和改良提供了一种新的方法。1983年，人们首次把培养7d的幼苗下胚轴作为外植体，建立了高效的 细菌的抗卡那霉素基因插入植物细胞核基因组中， 转化体系。云南农业大学林良斌等¨叫用花油3号 并且成功地表达。1985年，Horsch旧1获得了第一例的小孢子作为外植体，建立了甘蓝型油菜小孢子的 转基因甘蓝型油菜以来，油菜生物技术的研究便蓬 基因枪转化体系。林良斌等11¨还采用子房注射法， 勃发展起来。云南省油菜转基因研究始于1994年， 以子房为转化载体，成功将BT杀虫蛋白的基因成 早期的转基因技术来源于中国科学院遗传与发育生 功整合到油菜基因组中。 物学研究所，转基因油菜的应用研究，如油菜品质改 1．2基因转化技术 良，提高油脂量、杂种优势、抗病虫等方面都已取得 基因导入植株的方法主要有农杆菌介导基因转 一定的进展。 化法、基因枪DNA直接导人法、种质系统介导转化 法等。 1 油菜转基因受体和转化技术的研究 1．2．1农杆菌转化法利用农杆菌(根癌农杆菌 1．1转化外植体 和发根农杆菌)作为介体进行转化。作为最常用的 转化外植体的选择是成功实现基因转化的首要 基因转化方法，其转化受体广泛，转化技术较成 条件之一。适宜的转化外植体必须具有高效稳定的 熟。云南油菜在转基因育种中主要利用农杆菌作为 再生能力、较高的遗传稳定性、稳定的外植体来源和 油菜转化载体进行目的基因的转化。具体方法如 取材方便，并且具备对选择性抗生素有一定敏感范 下：将幼苗下胚轴切成0．5—0．8cm的小段，于含有 围、对农杆菌或其他转化方式具有较高的感受状态。 农杆菌(悬浮过夜至对数生长期)的MS液体培养基 油菜的转化外植体主要以下胚轴∞]、子叶柄H]、子 浸染30～60min后，吸干液体，共培养3d；转入愈伤 叶‘5|、根‘6|、叶[7|、花药‘8I、小孢子‘91等组织作为转组织诱