杨树钙依赖蛋白激酶基因家族表达分析.pdfVIP

300bp 200bp 1.辽育 3 号；2.胡杨；3. DE-2007-001 （中间型）；4. DE-2007-007 （母本型）；5. DE-2007-008 （中间型）；6. DE-2007-053 （父本型）； 图2 辽育3 号×胡杨杂交后代SSR 分析 3 结论与讨论 3.1 1963 年，李驹曾进行过用母本花粉提取液处理柱头克服杨树派间远缘障碍的研究， 并获得远缘杂种小叶杨×胡杨，以后就没有这方面的报道。本研究也是用此方法以克服杨树 派间杂交障碍，但试验结果只获得黑杨辽育 3 号杨与胡杨的杂种，并不是对所有派间杂交障 碍都有作用，这很可能与不同基因型杂交障碍机理不同有关，需进一步深入研究。 3.2 运用离体子房/胚珠培养能克服杂交后障碍，解决授粉后种子未成熟蒴果就脱落而 得不到杂种植株的问题，并随着授粉后天数的增加，杂种胚败育前，胚珠会逐渐发育成熟， 萌发率也会相应提高，这与在青白杨之间杂交研究结果一致。 3.3 杂种亲子鉴定表明，在形态上，杂种主要偏向于中间型，偏父母本型较少。亲本和 子代的 SSR 标记表明，子代的确有胡杨的基因。 参考文献 [1]王世绩,陈炳浩,李护群.胡杨林[M].北京：中国环境科学出版社，1995 [2]卫尊征，张金风，张德强，等. 白、青杨派间杂交幼胚培养及杂种子代的分子鉴定.2008，30 （5）：73-77 [3]彭儒胜，张兴芬，赵继梅，等.胡杨杂交育种研究初报.辽宁林业科技，2009，2:24-25 [4]黄秦军，苏晓华，张香华.SSR 分子标记与林木遗传育种.世界林业研究，2002，15 （3）：14-16 杨树钙依赖蛋白激酶基因家族的表达分析 张进 李建波 刘伯斌 陈军 卢孟柱 林木遗传育种国家重点实验室，中国林业科学研究院林业研究所，北京 10091 摘要：钙依赖蛋白激酶（CDPKs ）是生长发育信号和逆境信号诱导钙信号的重要信号传递 体，在调控植物信号转导途径中下游基因的表达、生理生化代谢等生物学过程中有重要作用。 为给进一步研究 CDPK 基因在木材形成过程中的作用，本研究在基因组水平上对杨树 CDPKs 基因家族的成员进行分析，找到 32 个 CDPKs 及 10 个 CRKs。同时利用这些基因编 码的氨基酸序列与拟南芥中 CDPK 基因的氨基酸序列构建了系统进化树，与拟南芥一样， 杨树 CDPK 基因家族也可以分为 4 个亚族。通过对杨树和拟南芥 CDPK 基因家族成员基因 结构比较，发现杨树 CDPK 基因内含子的插入位置相对比较保守。对 CDPK 基因家族成员 在杨树不同组织、不同节间之间以及毛白杨次生维管发育不同时期的表达特性进行分析，发 现。克隆得到了杨树在次生维管组织中 CDPK 基因家族中三个基因 PtCPK1 、PtCPK6 、 PtCPK15 ，对其组织表达特异性进行分析，发现 PtCPK15 在各组织中表达量均较高。对这 三个基因序列结构分析发现，它们都存在一个跨膜区，随后我们将 PtCPK1 、PtCPK6 及 PtCPK15 基因分别与 YFP 构建融合表达载体，注射烟草下表皮叶片瞬时表达研究其亚细胞 定位，发现选取的 PtCPK1 、PtCPK6 及 PtCPK15 都定位在细胞膜上，这与通过序列分析预 测的结果一致。随即我们还构建了 PtCPK1 、PtCPK6 、PtCPK15 植物表达载体并得到了超表 达转基因拟南芥，其中 PtCPK15 的超表达及RNAi 抑制表达载体转化银腺杨 84K 获得转基 因植株。为进一步研究 CDPK 基因功能奠定了基础。 关键词：杨树；CDPK；基因家族；基因表达 引言 植物在整个生长过程中，受到各种内外因素的影响，这就需要植物体准确地识别各种 信息并作出相应的反应，以确保正常的生长和发育。众所周知，细胞中游离的 Ca2+是植物 细胞信号转导的重要的第二信使，它在植物生长发育过程中起着十分重要的作用。从植物个 体发生来看，Ca2+参与从种子萌发、生长发育、形态发生到开花、花粉萌发及受精等植物生 长发育过程；从细胞水平来看，Ca2+参与细胞增大、分裂及分化的调控；从具体反应过程看， Ca2+参与植物逆境反应、激素诱导的许多过程、向性生长、