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几种药物对体外培养成骨细胞的增殖和骨形成功能影响
上海医科大学骨代谢研究室(上海∞0032)
金慰芳王洪复魏道林超咏芳 高艳红
要的
骨,
取第2继代成骨细胞(o码)进行药效试验。观察指标为:“)细胞增殖,蝴阿法;(2)ALT活性测定,
对硝基苯膦酸盐法;(3)矿化结节计数,茜素红染色法≯结果表明:补肾中药、密钙息、L一苏糖酸盐
对成骨细胞的增殖、分化和矿化结节形成均有明显刺激作用,而长春新碱对成骨细胞的增殖、分化和矿
化功能表现明显细胞毒作用:金葡液显示对成骨细胞增殖、分化无明显影响,但有明显促进矿化结节形
成的作用。
关键词:成骨细胞骨形成药物
骨质疏松症与其诱发的骨折已成为人类老年时生活质量下降和寿命缩短的主要原因之一,因而对有
效防治骨质疏松的药物研究是近四分之一世纪以来十分重视的课题。目前有关抗量吸收功能的药物颇
多,而促进骨形成的药物甚少。因此,研究对成骨细胞有刺激作用而促进骨形成功能的药物在骨质疏松
症防治中显得尤为重要。几年来本实验室注重于研究对成骨细胞的增殖和骨形成功能有促进作用的药
物,结果简要报道如下:
1.成骨细胞体外培养
密度接种于培养瓶中,至半汇合时传代,取第二继代细胞(OB):进行药效实验。
2,成骨细胞增殖和骨形成功能测定指标
成骨细胞是骨形成细胞,具有增殖、分化和合成分泌胶原以及与骨形成有关的多肽蛋白质的功能。
在药救评价中,通常采用以下指标:
(I)细胞增殖:
肼方法在酶标仅上进行测试,以波长570处的oD值表示细胞增殖情况,结果与对照组比较。
(2)ALP活性测定:
合后用对硝基苯膦酸盐法剥细胞溶解渡中的A廿活性、用考马斯亮兰法测定蛋白含量,以u/n瑶蛋白表
示ALP活性,结果与对照组比较。
(3)矿化功能测定:
色,光镜下矿化结节计数,结果与对照组比较。
3.结果
(1)补肾中药的影响
中药l
表l中药I对正常成骨细胞体外增殖的影响(nmn±s,N=4)
A铘
实验批数 1 2 3 4 5 6
0.527±O.0巧0.552±0.O鸺0.670±0位20.626±0.0篮
对 照 0.瑚±O.0660.250±0.028
0.258±0.04|0O.577±O.038
10一” 0.728±0.032—
0.678±O.0.3
104 O.591±0.014‘‘
0.248±O.㈣ 008—0.685±0锄
l俨 030… 0.研±0010—0580±0
0.8lO±O
I仃7 0{∞3±0.023‘’0718±0.010‘’
lO山 0.806±0.嘟一0355±0.094。0672±O034…0.613.0±0.033。0.766.O±0038—0718±0.062+
10—5
100 0.7∞±0.045’ 0882±0013…
正常对照 O.276±0.008 0.670±O.022 O.4{;4±O.004
衰老对照 O.179±0.004 0.432士0.017 O.458±0.O昕
IO一9 O.175±O.003 0.422±0.020
lO一8 0.18l±0.007 0.429士0.018
lO一7 O.188±0.009 0.445±0.03l O.465±O.02l
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