用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂基因入A导水稻获得转基因植株.pdfVIP

江苏农业学报(Jiangsu_，．ofAgr．Sci．)，2005，21(4)：245～248 245 用花粉管通道法将慈姑蛋 白酶抑制剂基因(A )导入 水稻获得转基因植株 王才林 ， 朱 镇 ， 赵 凌 ， 张亚东 ， 林 静 ， 张所兵 ， 陈 涛 ， 刘贤进 ， 王冬兰 ， 黄骏麒 ， 龚蓁蓁 (1．江苏省农业科学院粮食作物研究所暨江苏省优质水稻工程技术研究中心，江苏 南京 210014；2．中国科学院上海生物化 学研究所，上海 200031) 摘要： 采用花粉管通道法遗传转化技术，将慈姑蛋白酶抑制剂基因(AP，)导入水稻品系9311中，获得 了转基 因植株。抗虫性鉴定结果表明：部分转基因植株对水稻螟虫的抗性比对照明显提高；PCR扩增获得了与引物扩增 片段长度相同的DNA片段 ，证实AP／基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明，AP，基因能在有性生殖 过程中传递给后代，并于rr4代分离出抗性纯合的株系。 关键词： 水稻；抗虫；慈姑蛋白酶抑制剂基因；转基因植株 ；花粉管通道法 中图分类号： s511．2 10．353 文献标识码 ：A 文章编号： 1000A440(2005)04-0245—40 TransgenicRicePlantResultingfrom Introduction ofArrowheadProtein． aseInhibitorGene(A )intoRicebythePollen-tubePathwayMethod WANG Cai-lin ， ZHUZhen ， ZHAOLing ， ZHANGYa．dong LINJing ， ZHANGSuo—bing ， ， CHENTao， LIUXian-jin， WANGDong．1an，HUANGJun．qi， GONGZhen—zhen (1·Insti把ofFo。dCrops，Ji。rigs“AcademyofAgricuh“ralScieM∞，Ji。ngs“RiceRDCenterNanjing210014，China；2．Sh。ngh。iInstit把ofBio- ． chemistry，AcademySinica，Shanghai200031。China) Abstract： Transgenicriceplantswereobtainedbytransferringthearrowheadproteinaseinhibitorgene(AP／)into riceline9311throughthepollen—tubepathwaymethod．Sometransgenicriceplantswereprovedtohaveexpressedbetterre— sistancetoinsectpestthanthecheckline9311．AnalysisofPCR showedtheintegrationofAP／geneintothegenomeofthe transgenicplant．GeneticanalysisindicatedthattheAP／genewasgeneticallydeliveredtotheprogenyandhomozygouslines withinsectresistanceappearedinT4． Keywords：rice(OryzasativaL．)；insectpestresistance；APIgene；trnasgenicplnat；pollen．tubepathwaymethod 世界上每年由于鳞翅 目害虫危害造成的稻米损 1．2×10hm 和0．5×10hm J。防治水稻害虫有 失近 1．0×10 t 。近年来 ，中国水稻受稻飞虱、 化学防治、生物防治和种植抗虫品种等方法。抗虫 三化螟、二化螟为害的面积分别达 1．7×10hm 、 育种是防治害虫最经济有效的方法，但常规抗虫育