白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的研究近况.pdfVIP

维普资讯 磁盘 采采冬 闩丞 ％ 、 27 、 自念珠菌分泌型天冬氨酸蛋 白酶的研究近况 辜 ．譬，皮肤病研究所兰坚嫁速刘糙 审柱 、；77、 摘要 现 已肯定天冬氯馥蛋白酶与白念珠 凶致病的关皋．近年来的研完使人们舛这一酸 - l生蛋白酶的生转学特征、缩码基因家族及其表达、与毒力的关来、此酶在 白盘珠菌致病中的 作用有 1更深入 的1解 ，使之有希望成为一个治疗 白念球 菌感染的新的靶分子 。 白念珠菌是 目前免疫功能低下宿主机会 SAP 之间亦有大约 77 同源性 ，提示 3种 感染的最常见病原之一 。天冬氰酸蛋白酶是 基因几乎同时 自一个共 同祖先分化而来…。 白念珠菌所分泌的一种胞外蛋白酶，它与胃 1994年M；yasaki等在对 SAP1的两翻区域 蛋白酶和 肾素一样周届酸性蛋 白酶 。1965年 进行克隆及测序时发现了SAP．，包括一个延 由Staih等首先发现该酶 ，以后 I起众多研 长的前导序列 它位于SAP 的上游．并与之 究者的兴趣 ．并正式命名为分泌型天冬氯酸 前 后相连 ．总 长度 为 1618bp 。1994年 虽白酶 (Sap)。有关此酶的生 比持征，不 同 Monod等在非严格杂交条件下 以SAP。为探 的实验室结果不尽相 同 f。不周菌株来源 的 针克隆筛选 出SAP基 因的另外 3个成员即 Sap的肘r为 (40~50) ×l ．pI为 4．0～ SAP 、S^．P·、SAP，，其 中SAPsSAP。编码 4．5，酶活力的最适 pH值为 z．2～4．3。20世 的氰基酸序列N端包括分秘信号序列；与其 纪 80年代的研究主要间接证实 了Sap与 白 他 SAP编码氮基酸序列比较，SAP 不仅为 念珠菌致病力有关．20世纪 90年代的研究 最具分散性蛋 白，而且包古一个较长的有单 主要集中在SAP编码基因家族及表达，Sap 一 Lys—Lys加工位点的前序列 。 致病机制等方面 ．且有较大进展 。 二、SAP基 因表达与其调控 一 ， SAP编码基因家族 许多学者通过体外实验对 SAP基因表 此家族成员现 巳发展到 9个 ．其中前 7 达及其在转录水平的调控进行了研究。Hube 个巳克隆基因分别编码一种成熟蛋 白．后 2 等 利用Northern分析法研究了SAP基因 个只是通过 N端氰基酸序列分析推测其存 在不同菌株和不同血清型中的表迭情况，其 在。 l991年 Hube等 通 过 对 白念 珠 菌 中SAP 和 SAPa在 w—O表型 (w 型细胞在 ATCC10231株的 SAP编码基因进行克隆 ， 琼脂上形成 白色菌落IO型细胞在琼脂上形 发现一个 1137bp的插 入序 列 。并命名为 成粗糙不透 明菌落)转换 中被调节 ，即O型 sAP-引 1992年 Wright等从 ATccl0261 细胞可产 SAP、SAP，，而 w 型细胞 只产 株白念珠菌中克隆出SAP 基因，为1194hp SAPa，SAP，也在SAPj呈高表达条件下的酵 的开放阅读框架 ，序列中无 内含子 。。1993 母细胞 中表达 。SAP mRNA作为白念珠菌 年 White等采用 SAP的一个 片段在非严格 酵母相的星性转录本．可 被 SAP：的活化 杂交条件下检镬I一个基因文库，豫克隆 出 肽类产物 自动诱导生成．但可被氰基酸所抑 SAP 和 SAP2外 ，并克隆出SAP 基因 进 制。紧密相连的 SAP．～sAP 基因只在