环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体.pdfVIP

农业生物技术学报 袁 年 袁第 卷 袁第 期 袁第 2010 18 4 822~826  JournalofAgriculturalBiotechnology,2010,Vol.18,No.4,822~826 技术改进 Updated Technology 环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体 郭盼盼 黄书林 张跃伟 付 萍 李旭妮 李佳禾 吴文学 * 中国农业大学动物医学院 ， 北京 100193  ， *通讯作者 wuwenxue@  摘 要 利用环介 导等温扩增 (loop­mediated isothermal amplification, LAMP) 方法建立 了猪肺 炎支原 体 Mycoplasma hyopneumoinae 的快速检测方法 。该方法 以猪肺炎支原体保守性基 因 为靶序列设计 ( ) 16SrRNA 了 条特异引物 ， 在 等温条件下 ， 即可完成反应 。 结果显示 技术优于 技术。 在敏感性 6 63℃ 30min ,LAMP PCR 实验 中， 方法 的能检测出 个包含靶基 因片段 的重组质粒 ， 敏感性高于 方法 倍 ； 特异性实验 LAMP 10 PCR 10 中， 方法和 方法均显示 出了高度 的特异性 ； 在对 个 临床鼻拭子样本 的检测 中， 方法检 LAMP PCR 127 LAMP 测结果是所有样本都为 阳性 ， 而 PCR 检测 出了 116 份阳性 。 证 明本研究所建立 的方法， 对 临床样本 的检测 的 敏感度高于常规 的 法 。 方法具有操作简便 、 快速、 高效 、 敏感 、 特异 、 经济 的特点， 在研究机构 以及 PCR LAMP 基层实验室 、 现场监测 的广泛使用具有一定 的潜力。 关键词 猪肺炎支原体 ， 环介导等温扩增技术 ， (Mhp) (LAMP) PCR  Loop­mediated Isothermal Amplification for Sensitive and Rapid Detection  ofMyc oplasma hyop ne umoniae  *  GuoPanpan Huang Shulin ZhangYuewei Fu Ping LiXuni LiJiahe WuWenxue  VeterinaryMedicineDepartment,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing 100193,China  *Correspondingauthor,wuwenxue@  DOI: 10.3969/j.issn.1674­7968.2