核酸适体电化学生物传感器用于肝癌甲胎蛋白异质体的检测.pdfVIP

第十一届全国电分析化学学术会议 核酸适体电化学生物传感器用于肝癌甲胎蛋白异质体的检测 1 2 张静 ，陈敬华* 1福建卫生职业技术学院，福州 福建，3501012; 2福建医科大学药学院,福州 福建， 350108 *联系人 Email: cjh_huaxue@126.com 本文以肝癌甲胎蛋白异质体(AFP-L)为研究对象，研制了一种基于蛋白诱导 适体（Aptamer ）片段连接技术的灵敏、特异性AFP-L 识别电化学生物传感器。 将AFP-L 核酸适体DNA 序列切成两条，其中一条作为捕获探针，通过5′端修饰 的巯基，以Au-S 键固定在金电极表面；另一条作为检测探针，3′端修饰二茂铁 基团（Fc ）。利用核酸适体与AFP-L 蛋白的特异性结合作用，连接两条切开的适 体序列在电极表面形成稳定的适配体复合物。目标物 AFP-L 不存在时，检测探 针与捕获探针结合很弱，几乎没有电化学信号。当 AFP-L 存在时，两条序列的 结合能力增强，在电极表面形成稳定的适配体夹心复合物，使检测探针捕获到电 极上，从而使Fc 基团紧靠电极表面，发生电化学氧化还原反应。通过测定电极 表面Fc 的电流信号，实现对目标AFP-L 蛋白的检测。实验结果表明，在最佳条 件下，Fc 的峰电流与AFP-L 蛋白在0.4~10 nM 的浓度范围内呈良好的线性关系， 检测限达到（S/N=3）0.08 nM 。本文以两条切开的适体DNA 探针做为目标分子 识别元件，具有更高的灵敏度和更低的背景电流。同时利用了信号放大的标记技 术，不仅操作简单，而且检测的选择性也得到了提高，有望用于实际样本中AFP-L 的检测。鉴于该检测手段具有简洁，快速、灵敏、准确等优点，有也望将其推广 用于各类新型光学传感器的研制。 致谢：福建省卫生厅青年科研基金资助项目（No. 2010126 ）；福建省教育厅科研 基金资助项目（No. JA09116 ）;福建省自然基金资助项目（No. 2009J01023 ）；福 建省高校杰出青年科研人才计划资助项目（No. JA10295 ） 参考文献 1. Oka H., et al. J Gast roenterol Hepatol, 2001,16 (12): 1378-1383. 2. Zhang J., et al. Biosensors and Bioelectronics, 2011, 26 (5): 2645-2650. 3.Chen J. H., et al. Biosensors and Bioelectronics, 2010, 25 (5): 996-1000. 4. Zhang J., et al. Chem Commun, 2010, 46, 6986-6988. 5. Chen J. H., et al. Chem Commun, 2010, 46, 5939-5941. 第十一届全国电分析化学学术会议 Detection for alpha fetoprotein heteroplasmon of liver cancer based on the aptamer electrochemical biosensor 1 2 Jing Zhang , JingHua Chen * 1. Pharmaceutical Department, Fujian College of Medical Occupation and Technology, Fuzhou, Fujian 350101, China. 2. Department of Pharmaceutical Analysis, Faculty of Pharmacy, Fujian Medical University, Fuzhou, Fujian 350004, China