抗人IA亚类单克隆抗体的鉴定g及其初步应用易≥.pdfVIP

．2 一 f 学 抗人 IgA亚类单克隆抗体的鉴定 及其初步应用 ， 易≥ ／ 型 魏庆兰 刘新铭。 赵 红 兰佩贤 林 卫 本室耙备的28抹抗人 SIA重链 (q链)McAb中，鉴定 出3抹 (3D．、30C 41C)抗人 IgAl亚娄 McAbs{6抹 (7co、15Ba、23D6、16Ca、20Ca、45D6)抗人 IgA2亚类 的McAbs{其余为抗人 IgA两种亚类抗原共 同决定簇 的 cAbs。抗人 IsA 及 IsA 两种亚娄抗原特异性McAb。用以耙备 Sepharose4B亲和层析柱 ，建立 了获得高特异性 ／的IgA亚类抗原快速准确的方法。通过 ELISA 间接法 ，建立了测定正常人血清及初乳 中两种亚类含量的方法 ，同 时，一份 IgA骨髓瘤血清被证 明为人IsAt亚娄骨髓瘤血清。实验证明，这些抗人 IgA亚类 McAbs稳定性高，特异 性强 ．能用于人 IsA(SIgA)及 IsA亚娄 (SIgA亚娄)的纯化 ，检测、免疫后抗体动态观察及SIgA亚类分子的研究。 关键调 ： McAb}人 IgA{人 IgA亚娄抗原 ，4缘 嘘 人 IgA，特别是在呼吸道及肠道局部免疫 各板以酶标抗原不加 McAb为 阴性对照，以酶标抗原 中起重要作用的SIgA，越来越受到重视 ，研究 加与被包被 McAb同株 的McAb为阳性对照，同时设 人 IgA两种亚类在免疫过程 中的动态，有非常 空白对照 ，结果以下列公式判断： 临界值(曲t。fi)=旦些壬塑 旦堕{ 丝王塑旦里 重要的意义。近年来 ，抗人 IgA亚类 Mcab的 研制 ，仅 国外有少数报道…，国内尚未见正式报 ≤此值为阳性 ． 5．效价捌定 ：以人SIgA 免疫球蛋 白工作标准 (本 道 。本研究采用杂交瘤技术，得到 3株抗人IgA 研究室耙备)5~$／ml包板，各抹McAb从 l0 起 l0倍 亚类特异性 McAbs，6株抗人 IgAz亚类特异性 系列稀释，ELIsA间接法测定，同时各株McAb倍 比稀 McAbs，并进行了初步应用 ，现将结果报道如 释后 ，在含 3 PEG6000的琼脂糖平板上测定免疫双 下 ： 扩散效价 。 材料方法 结 果 1．28株分泌抗人 IgAMcAb的杂交囊细胞株 ：系 1．抗人 lgA亚类 McAb的鉴定：用Jaclin— 本实验室构建 。 P—Sepharose4B亲和层析柱提纯人 IgA亚类抗 2．IgA及 SSIA纯抗原的翩备 ：以溴化氰活化法。 原．经抗人 ct及 嘞McAb参 比标准品(日本 国 制备羊抗人SIA—Sephar~e4B亲和层析柱。分别取健 立遗传研究所森胁教授惠赠)测定，两者之间无 康人血清及初乳提取 IgA及SIgA．并用免疫 电诛法分 交叉反应。此法分离的IgA亚类抗原纯度高、特 别测定纯度。 异性强 ，可作为标准 IgA亚类参 比标