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GSH广泛分布于哺乳动物、植物和微生物细胞内,是最主要的、含量最丰富
的含疏基的低分子肤。细胞内浓度为0.1~10nuno比,哺乳动物细胞中最高可达
12~。比[4l;血浆内浓度仅1一5娜。比,约为细胞内浓度的千分之一。GsH在细胞
器中的分布是不均匀的,真核细胞中近90%的GSH分布于胞质,约10%分布于线粒
体,其它极少部分分布在内质网。
1.1.1.2.3电化学测定法
化学修饰电极是分析化学中飞速发展的一个研究领域。它可以降低过电位,
提高电化学反应的速率及电极的选择性和灵敏度,并可以测定多种具有电活性和
非电活性的生物样品。各种无机修饰电极(苯二甲蓝复合盐、普鲁士蓝、水钻胺
素、钻钦普等)、酶修饰电极、多孔石墨电极、粉末微电极(PME)、纳米材料
修饰电极以及碳陶瓷(CCEs)等各种电极被用于测定谷肤甘肤。粉末微电极具
有很大的实际面积/表观面积比,能显著提高电极反应的表观反应速率及表观可
逆性。采用碳粉末电极替代金属电极还可以减少由于GSH的电活性基团一SH在金
属电极(如Pt、An等)表面发生强烈的吸附而引起的电极中毒现象。电化学测定方
法不需要衍生的步骤,在简便性上有一定的优势。
施国跃[20]等将coPc化学修饰电极为工作电极的安培薄层电化学检测器与
HPLc联用,在工作电位为+o.sv时,GSH在3.0x1o一LO、10-smo比浓度范围内
与峰电流呈良好线性关系,相关系数为0.9991,检测限为1.oxlo币mo比。将该方
法应用安静、力竭及恢复三种运动模型的大鼠心肌线粒体中GSH的测定,获得满
意的结果,该方法简便、快速,且灵敏度较高,为电分析化学在生物学及运动生
理学等生命科学学科的应用提供新的手段。
杨培慧[2‘]等采用循环伏安法研究GSH影响铬(VI)在金电极上的电响应,结
果在含o.oolmo比的HZSO4的O.lmoULNaNO3溶液中铬(班)离子在金电极表面于
+0.ZV(vs.SCE)有较强的还原峰,并且随着GSH的不断加入峰电流逐渐减小,在一
定的浓度范围内GSH加入量与峰电流的下降呈线性关系,其线性范围为
7.0、10一8一1.oxlo一gmo比,检测限为l.oxlo一知。比,RsD为0.4%。
陈剑[2z]等研究了GsH在铂、玻碳电极以及用乙炔黑填充的粉末微电极
(AB一PME)表面的电化学行为。结果表明,在铂和玻碳电极上,相应的CV曲
线均未出现氧化电流峰或电流平台。而在AB一PME电极上,GSH电化学氧化的表
观可逆性得到明显提高,其超电势较常规电极下降约0.SV。且其氧化电流峰,与
溶液本体的GSH浓度成良好线性关系。采用此法可完全消除AA和尿酸(UA)对
GSH测定的干扰,由内标法成功地检测了人体血液中的GSH的浓度。
何忠于[23]等分别用乙炔黑粉末和Ketjenblack粉末填充的微电极检测了溶液
中GsH和cys的浓度。GsH和cys在粉末微电极上的检出限分别为3.4xlo一。uL
和2.sxlo一6mol/L,线性范围分别为3.6xlo一5~4.sxlo一mol/L和l.sxlo石~
5.0、10’3moFL,完全避免了尿酸和对乙酞氨基苯酚对测量的干扰。
Calvo一Marzal[24]等使用基于竹F一TcNQ复合物的安培检测器对溶血红细胞
样品中的GSH进行了检测,在电位为200mV(vs.sCE)时线性响应范围为5~
延边大学硕士研究生毕业论文
340娜叨1,灵敏度为90.1林刀ITnnol.crnz,检测限为0.3卿功。检测结果与光谱法具
有很好的相关性,回收率在98~102%之间。
HanH[25]等使用循环伏安法,研究了cys、GsH等硫醇在单层碳纳米管薄膜
和PQQ修饰的玻碳电极上的电催化氧化性质。在pH为7.5的磷酸缓冲溶液下,Cys
的氧化峰电流为0.27v(vs.A留AgCI),比其他电极如裸玻碳电极、金刚膜电极
的氧化电位更正。当cys、homocysteine、N一乙酞一L一半肤氨酸、青霉胺
(L一penicillamine)和GsH底物浓度在10石一10一,mo比,检测限10石一10一恤。比时
具有良好的线性关系。此电极响应时间2~35,稳定时间达3周,已成功用于营养
强化剂中Cys、N一乙酞一L一半肤氨酸的化验。
李平126]等研究了纳米铁氰化钻(CoHCF)修饰电极为电化学检测器与HPLC
联用,分别检测了cys和GsH。结果表明在2.0x10一7一2.0xlo礴mo比浓度范围内,
Cys和GSH的浓度分别与其氧化电流呈良好的线性关系,相关系数均为0.9998;
检出限分别为l.oxlo一7mo比和l.Zxlo一7moFL。
毛细管电泳由于具有分离效率高、试样用量小、仪器简单等优势而在许多分
析领域中得到广泛的应用。张延昌[2刀等以毛细管管悬
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