混合血小板在保存期中的活化情况的研究.pdfVIP

维普资讯 ·326· 中国输血杂志2004年1o月第17卷笙 塑 In』 !望 !)【!! ! ： ：!： ： 混合血小板在保存期中的活化情况的研究 林俊杰 邱颖婕 冯明亮 马 庆 范华骅 钱开诚 (上海市血液中心，上海 200051) 摘要：目的 了解混合血小板在保存期中的活化情况。方法 用无菌导管链接器将多袋同一血型的白膜层合并 为 1袋，并制成混合血小板，用流式细胞术测定该血小板 的CD62p和CD41表达量，同时检测其细胞 因子 IL一2、 IFN一 的浓度、血小板计数和pH值。结果 在保存期O～3d内混合血小板的血小板计数、pH值、CD62p和CD41表 达量无显著差异，并且其中IL一2和 IFN一7的浓度亦无显著差异。在0、1和 3d时，该血小板的CD62P阳性率和 CD41的平均荧光强度分别为(25．36±10．46) 、(26．57±¨．25) 、(29．83士1O．42) 及9．85±3．28、1O．29±3． 19、12．17±4．71；其 IL一2(pg／m1)和 IFN一7(pg／m1)的浓度分别为 29．64士4．56、33．29±5．86、31．3O±4．59及 64．65 士8．74、66．O2±8．87、62．51±9．47。结论 混合血小板在保存期中其血小板和残余白细胞无明显活化情况。 关键词 ：血小板 流式细胞术 CD62p CD41 细胞因子 中图分类号：R331．143 文献标识码：A 文章编号：1004-549X(2004)05—0326-03 浓缩血小板是全血的附加产品，由于其制作无需昂贵的 (日本 Nikon公司)。 仪器，因此价格较便宜。但是由于手工采集的浓缩血小板每 1．4 全血中血小板和 白细胞计数 用 CoulterM Ⅱ血细 袋血小板绝对数量较少 ，一次需输注几袋才能有效，并且在 胞仪检测 此过程中易引起细菌污染 ]。虽然用无菌导管链接器将多 1．5 单个浓缩血小板的制备和保存 将所制备的单个浓缩 袋血小板合并为 1袋可以解决该问题，但是来自不同的献血 血小板_2置 PVC塑料血袋22℃振荡保存3d。 者的血小板中的残余白细胞是否会引起混合淋巴细胞反应 1．6 混合血小板的制备和保存 混合血小板的制备和保存 导致受血者在输注该血液成分后产生副作用?为此研究该 方法同单个浓缩血小板 ，其中在制备过程中用无菌导管链接 成分在保存期中其血小板和白细胞的活化情况就显得较为 器将6袋白膜层合并为 1袋 。 重要。笔者用流式细胞术测定混合血小板在保存过程中GP 1．7 混合淋巴细胞反应 取上述 (6袋混合)白膜层 1Oml， Ⅱb／I1a(CD41)和 GMP-140(CD62p)的表达量，同时测定 1000g15min离心，吸取 白细胞层 ，用 PBS(pH7．2)稀释后 其白介素一2(IL-2)和7一干扰素(IFN-7)水平，现报告如下。 用 FicollHypaque分离液分离出单个核细胞；用 1OmlRP— MI1640(含 1O％胎牛血清，1％青链霉素)洗涤2次，混合淋 1 材料与方法 巴细胞培养体系中单个核细胞终浓度为2×1O／L；用24孔 培养板每孔加 1mlRPMI1640，37℃ 5 CO 孵育箱培养， l、l 试剂 MICR()_PAK试剂包 (C30306，美国 Beckman— 分别于3、5d取样 ，2000g10min离心，取其上清液 ，检测 IL一 Coulter公司)；C