凝胶过滤分离纯化酪蛋白糖巨肽的研究.pdfVIP

第29卷第2期 西 华 大 学 学 报 ( 自然 科 学 版 ) 2010年3月 VoL29，No．2 JournalofXihuaUniversity ·NaturalScience MRr．20lO 文章编号：1673—159X(2010)02-0195-04 凝胶过滤分离纯化酪蛋白糖 巨肽的研究 袁永俊，张秀媛，胡 婷 (西华大学生物工程学院，四川 成都 610039) 摘 要：酪蛋白糖巨肽具有重要生理功能，可广泛地应用于保健食品和药品。以Superdex7510／300GL为分 离介质，对酪蛋白的凝乳酶水解物中的酪蛋 白糖 巨肽进行分离纯化研究，结果表明，分离纯化 CGMP的适宜条件 为 ：O．1M醋酸铵平衡上样、洗脱 ，洗脱流速0．5ml／min；酶解上清液浓缩25倍上样，上样体积 0．5ml。分离所得的 CGMP由分子量分别为43000Da、30000Da和25000Da，糖基化程度分别为71．6峙 ／mg、99．1 ／mg和44．4~g／mg的 三个组分组成 ，其平均糖基化程度为76峭／mg，总蛋 白回收率为 1．45％。 关键词：酪蛋白糖巨肽 ；凝胶过滤 ；分离纯化 中图分类号：Q814．1 文献标识码 ：A StudyontheSeparationandPurificationofCasein GlycomacropeptidebyGelFiltrationChromatography YUANYong-jun，ZHANGXiu—yuan，HUTing (SchoolofBioengineering， 眦 University，Chengdu61．0039China) Abstract：Caseinglycomacropeptide(CGMP)canbewidelyusedinthefunctionfoodandmedicineduetoitsimportantphysiologi— calaction．TheauthorsstudiedtheseparationandpurificationconditionsforCGMPfrom rennasecaseinhydrolysatebyusingSuperdex 7510／300GLasmedia．Th esuitableconditionsofseparationandpurificationofrCGMPraeasof~ows：Superdex7510／300GLise- quilibratedandaddedsamplesandelutedwith0．1M ammonium acetatebuffer，elutedvelocityiS0．5ml／min，addedvolumeofsamples is0．5mlwhensupematantofcaseinhydrolysateisdewatered25times．Th epercentrecoveryofproteinandthedegreeofglyeosylation (siMicacid／protein)ofCGMPobtainedfromthehydrolysateaye1．45％ and76p,g／mgrespectively．TheCGMPcontainsthreecompo- nentswhosemolecularmassesare43000Da、30000Daand25000Darespectively，andthedegreesofglycosylation(sialicacid／protein) rae71．61xg／mg，99．1pLg／mgnad44．4 g／mgrespectively． Keywords：CaseinGlycomaerope ptide；Gelfiltrationchromatorgaphy，SeparationandPurification 酪蛋 白糖 巨肽 (casein．glycomacropept