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§1. 概述 §2. 基本原理 §3. 各类HPLC法 §4. 固定相 高效液相色谱 高效液相色谱 高效液相色谱 §5. 流动相 §6. 仪器 §7. 定性、定量分析 第一节 概述 第一节 概述 第一节 概述 优 缺 经典LC 适用范围广 效率低 GC 高效、高速， 300多万化合物中 高灵敏度、自动化 仅20%能用GC HPLC ：由经典液相色谱→HPLC有三个突破 1、高效填料：5 μm 10 μm 高效 （经典LC75-590 μm ） 2 、高压泵输液： 高压 3、高灵敏度的检测器： 仪器化 HPLC特点： 1、适用范围广 2 、高效 3、高速 -10 4 、高灵敏度（主要用UV 5 ×10 g/ml ） 5、流动相选择范围宽 6、柱可以反复使用（可用1-2年） 7、流动组分易收集 8、安全 第二节 基本原理 第二节 基本原理 第二节 基本原理 一、范氏方程： 1、柱内展宽： H=A+B/ μ+C μ (A涡流扩散 B纵向扩散 C传 质阻抗) 在前述气相GC中B=2rD 5 中D 比HPLC中大10 倍 m m 在HPLC中第二项可忽略，故高效液相色谱的范氏方程 为： H = A + Cμ H=A+C μ ① 涡流扩散项：A=2 λd ρ （λ-不规则因子 dp填充物直径） ② 传质阻抗项引起板高：C=Cm+Csm+Cs 由于目前大都使用数学键合相，以C 可忽略。 s 1 2 C d s  a、引起部分：H = u —忽略 s D s C —常数与颗粒内空隙体积分数及容量因子有关。 s d ρ填料直径 D —组分在固定相中扩散系数。 s 固定相的粒度d