实验十五+邻二氮菲吸光光度法测定铁.docVIP

实验十五 邻二氮菲吸光光度法测定铁 一、实验目的 1．掌握光度法测定铁的原理及方法 2．学会722分光光度计的正确使用。 3．学习如何选择吸光光度分析的实验条件。 二、实验原理 邻二氮菲(phen)是测定微量铁的较好试剂。在pH＝2～9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的红色配合物，其lgK＝21.3，摩尔吸光系数ε = 1.1×104 mol/ L，其反应式如下： Fe2+ + 3(phen) === Fe(phen)32+ 红色配合物的最大吸收峰在510nm波长处。当铁为+3价时，可用盐酸羟胺还原， 本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、PO43-，5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。 吸光光度法的实验条件，如测量波长、溶液酸度、显色剂用量等，都是通过实验来确定的。本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度-某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。 三、仪器与试剂 1．仪器 722型分光光度计、酸度计、容量瓶（50mL）、吸量管（5mL，10mL）等。 2．试剂 （1）铁标准溶液 准确称取0.176克分析纯硫酸亚铁铵（FeSO4 ·(NH4)2 SO4·6H2O）于小烧杯中，加水溶解，加入6mol∕L HCl溶液5mL，定量转移至250mL容量瓶中稀释至刻度，摇匀。所得溶液每毫升含铁0.100 mg（即100ug/mL）。 （2）0.15％邻二氮菲（又称邻菲咯琳）水溶液： 称取1.5g邻二氮菲，先用5～10mL 95％乙醇溶解，再用蒸馏水稀释到1000mL。 （3）10％盐酸羟胺水溶液（新鲜配制）； （4）HAc－NaAc缓冲溶液（pH＝4.6）： 称取136g醋酸钠（CH3COONa·3H2O），加60 mL冰醋酸，加水溶解后，稀释到1000mL。 （5）1mol∕L NaOH溶液 （6）6mol∕L NaOH溶液 四、实验步骤 (一)实验条件的选择 1．吸收曲线的制作和测量波长的选择： 用吸量管吸取0.0，1.0mL铁标准溶液（100μg/ml），分别注入两个50mL比色管中，各加入1mL盐酸羟胺溶液，2mL邻二氮菲，5mL NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标准溶液）为参比溶液，在440～560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测定一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。 2．酸度影响（酸度对显色剂的影响、酸度对被测金属离子状态的影响、酸度对络合物形成的影响。） 于8只50 mL容量瓶（或比色皿）中，用刻度移液管各加入1.0 mL 100μg/ml的铁标准溶液，再加入1 mL盐酸羟胺溶液和2mL邻二氮菲溶液，摇匀。然后分别加入NaOH溶液0.0 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL。用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10 min后分别测定各溶液的pH值和吸光度。吸光度测定条件为：1cm比色皿，蒸馏水作参比，测定波长为λmax。 本实验选择pH=4-6，一般选为5，可以直接用醋酸钠缓冲溶液调节pH=5，不进行这步测定。 3．显色剂用量的影响 取7个50 mL容量瓶（或比色皿），依次加入1.0 mL 100μg/ml的铁标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液摇匀。再分别加入邻二氮菲溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.8 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL和5.0ml的NaAc，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10 min后测定各溶液的吸光度。 吸光度测定条件为：1cm比色皿，以蒸馏水作参比，测定波长为λmax。 （二）铁含量的测定 1．标准曲线的制作： 用移液管吸取100μg·mL-1铁标准溶液10mL于100mL容量瓶中，加入2mL 6mol·L-1的HCl，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含Fe3+ 10μg。在6个50mL容量瓶（或比色管）中，用吸量管分别加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 10μg·mL-1铁标准溶液，分别加入1mL盐酸羟胺，2mL Phen，5mL NaAc溶液，每加一种试剂后摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。用1c