基因型对玉米花药和盾片离体诱导频率的影响.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 4(4);8-19」全些 基因型对玉米花药和盾片离体诱导频率的影响 郭 彩 月 曹孜义 甘（肃农业大学农学系植物生理教研组，武威） 近年来随着玉米细胞和组织培养研究的进 升汞中消毒 12-15分钟，为消毒彻底，在消毒 展，已开始着手在细胞和组织水平上改良玉米。 时应时时摇动，取出后用无菌水冲洗3次。用虹 Green等133诱导玉米盾片愈伤组织首次获得体 膜刀从籽粒上无菌地剥取胚，将2.5-3毫米完 细胞再生植株。Gengenbach等16［1从诱导的体细 整的幼胚倒放在培养基表面上，即：有胚的一面 胞组织筛选获得抗大斑病的玉米品系。中国科 向下，盾片一面向上，每瓶放 10个幼胚。培养 学院遗传研究所111首次获得玉米花粉植株。中 基按 Green[51培养试验配方，即：MS培养基的 国科学院植物研究所等12［1获得玉米花粉植株 自 无机盐十Straus培养基的有机成分 甘［氨酸7.7 交结实，为快速培育玉米自交系开创了道路。吴 mg/1（下同）；烟酸 1.5;盐酸硫胺素0.25;盐酸 甲林等I31、陈力等习〔通过花粉培养获得优良自交 毗哆素0.25；泛酸钙0.25；天门冬酞胺2000), 系而开始组配杂交种。这些报道均提到诱导及 2,4-D 1mg,2%0o蔗糖，0.7%琼脂。在 22- 诱导频率高低与基因型有关。用花药培养易于 28℃下，1200Lux白炽灯每天照光12小时进 和不易于诱导的玉米杂交种能否诱导出体细胞 行培养。 再生植株？它们二者有无关系。本文报道这方 从幼胚盾片上培养出的愈伤组织，转移到 面的试验初步结果。 加有0.25mg/1的2,4-D或不加的上述培养基 上，成苗后转至 White培养基上，以促进幼苗 材 料 和 方法 的生长。 试验主要用当地玉米杂交种，于孕穗期在 将发育正常的花粉小植株和体细胞再生小 田间选取玉米雄穗主轴中上部第一小花花粉处 植株从培养基上小心取出，洗去根上粘附的培 于单核靠边期、第二花和大部分第一花花粉处 养基，栽于花盆中，放在20-2390、相对湿度60 于单核中期的花药，按常规方法11,［41接种于诱导 -70多的室内窗口下，开头几天用大烧杯覆盖， 培养基中，在25-280C、散射光下培养，当出现 正中午遮光，待成活后生长到5-6片叶时移至 愈伤组织和胚状体时，按一般方法转人到分化 温室。移栽时剪取小植株根尖，在饱和对氯二 培养基上’］［，在1200Lux日光灯照射下分化成苗。 苯水溶液中预处理3-，小时，用卡诺式固定液 试验用张双691、庆单32号、张掖486、维尔 固定12-24小时，铁矾一苏木精染色压片镜检， 42四个杂交种。在授粉 15-20天、在田间选取 统计根尖细胞染色体数。 生长健壮、无病虫的果穗，取回后即把果穗用湿 结 果 及 讨 论 纱布包着放人底部盛有少许水的盆中，在 2- 4℃冰箱中预处24-48小时。接种时，先用 一（）四个杂交种花药培养诱导及分化情 70外酒精棉球仔细擦洗苞叶，边擦边剥，余下最 GuoCaiyueetal.:EffectsofDifferentGenotypes 内1-2片叶，转入接种箱内，用解剖刀切去两 onInduction Frequencyin Antherand Scutellum 头，再切成长约5厘米的切段，去苞叶放人0.1形 Cultureof Maize in vitro 8 况 见表2, 四个杂交种是1977,1978两年进行的玉米 表2 四个杂种玉米后片愈伤组组份导及分化情况 花药培养的部分材料，诱