斑马鱼雌核紫外线辐射灭活及延迟受精的研究.pdfVIP

马鱼雌核紫外线辐射灭活及延迟受精的研究 1 2 1 1 杨景峰 ，杨智慧 ，刘伟成 ，曹颖霞 1 内蒙古民族大学动物科学技术学院(028042) 2 上海水产大学生命与技术学院(200090) email: yjf.china@163.com 摘 要 核灭活是雄核发育的第一个关键步骤，为研究紫外线对斑马鱼卵的 核灭活效果， 将斑马鱼的卵采用干法或置于纯水、Ringer 氏溶液和Cortland 鱼用生理盐水进行紫外线照 射，结果表明，各种方法中均得到畸形鱼苗，并经染色体检查大多为单倍体；四种方法中在 2 Cortland 鱼用生理盐水中灭活效果最好，120 mJ/cm 紫外线可以使 核完全灭活；干法处 理不能达到 核完全灭活的目的，在纯水中灭活后的卵子受精率 低。而延迟受精的结果也 表明，盐度较高的Cortland 鱼用生理盐水可以 好的保护卵子，维持较长时间的受精能力， 和其它处理方法有明显的差异。 键词 斑马鱼；雄核发育； 核灭活；紫外线；延迟受精 1．引言 [1] 雄核发育是后代仅保留父亲的染色体组的一种特殊有性繁殖方式 ，人工诱导鱼类雄核 [2] 发育技术被誉为鱼类育种的最先进技术 ，在鱼类性别控制、遗传分析、快速建立纯系以及 [3] 濒危动物保护等方面都有广泛的应用 。但是由于雄核发育技术还不是很成熟，许多问题还 处于理 探索阶段。斑马鱼是脊椎动物发育生物学的模式生物，由于其体积小、繁殖快、性 成熟早等特点，也是进行遗传育种理论研究非常好的研究对象。卵子染色体的遗传失活是人 工诱导鱼类雄核发育的第一个关键步骤，笔者采用紫外线进行了斑马鱼卵子雌核灭活及延迟 受精的研究，旨在为以斑马鱼为研究对象的雄核发育理论研究在实验方法上进行有益的尝 试。 2．材料和方法 2.1 材料鱼的来源与选择 实验所选用鱼的斑马鱼购于水簇市场。雌鱼体长5cm 以上，雄鱼4cm 以上。根据其体 型特征来鉴别雌雄，鳍短、腹部明显膨胀为雌鱼，鳍长、腹部不膨胀为雄鱼。 2.2 精卵的获得 将达到性成熟的实验鱼雌雄分开暂养7 天左右，暂养水温维持在28 ±0.5℃，保持水质 清新， 天投喂经2%盐水消毒的水丝蚓三次，以L ︰D= 14 ︰10 光周期促熟。在实验进行前 1 天，挑选成熟较好的雌鱼和雄鱼各数尾，放入一小的水族箱中，水深 10cm 左右，第二天