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PCR專用酵素 陽明大學的錢嘉韻教授發現 1976年從溫泉中分離出耐高溫的細菌Thermus aquaticus Taq 發現該細菌合成DNA的酵素可耐高溫,因而根據細菌的名字,將該酵素命名為Taq聚合酶 Taq聚合酶 最適合反應溫度為72 ℃,而在95 ℃ 30分鐘仍不會喪失其活性 讓PCR反應成為最廣泛、最有價值的實驗 DNA指紋(DNA fingerprinting): 用限制酶:切割特定的一段DNA,可以得到不同大小片段之DNA 用膠體電泳分析:依照電荷及分子量大小排序 DNA因為帶負電荷,故會向正極移動,分子量小的移動快,分子量大的移動慢,只要比對DNA指紋就能確知孩子的父母是誰 想一想 右圖為利用限制酶切割後,得到的不同大小DNA片段,經由膠體電泳後之照相圖,根據圖你能說出小孩的父親是男子1或男子2? 基因轉殖生物 具有外源基因的生物 基因轉殖:將重組DNA插入宿主細胞的染色體上,以培養出含外源基因的個體並表現出外源基因的特性 基因轉殖植物 植物的基因轉殖較動物容易,可用物理、化學或生物的方法將目標基因放入植物體內 目前最常見的方法:把重組DNA導入培養中的植物細胞,再藉組織培養的方法發育成幼苗 基因轉殖植物:具有外源基因的植物 基因轉殖植物如:蘆筍、胡蘿蔔、番茄、馬鈴薯及菸草等經濟作物 轉殖載體 農桿菌(Agrobacterium)的腫瘤誘導質體(Ti質體) 圖13-35 植物遺傳工程中使用Ti質體作為載體的示意圖。 利用Ti質體的一段DNA(稱為T-DNA)易嵌入宿主細胞染色體之特性 藉重組DNA技術,將外源基因嵌入Ti質體中,再直接導入植物細胞中 先將重組的Ti質體放回農桿菌內,再使其感染培養基中的植物細胞 可得到具有外源基因的植物 基因轉殖技術 廣泛應用於在農業方面 例如: 品種改良以提高作物產量 培育抗蟲、抗病、抗旱及種子富含胡蘿蔔素的植物 進階知識 黃金米: 科學家已成功地將合成胡蘿蔔素的三個基因(一個來自細菌,二個來自黃水仙花)轉殖入水稻的基因體組中 這種稻子生產出的米粒含有豐富的胡蘿蔔素,故呈橙色,稱為「黃金米」 Yhhhhhhhhhhhhhttttttg=[[[[ 含有胡蘿蔔素的黃金米 一般的白米 進階知識 基因轉殖過程: 必須選用適當方法,把已經重組的基因送入活細胞或活體中 科學家嘗試了許多物理或化學方法,如利用顯微注射法或用化學處理細胞 基因鎗 將DNA分子包裹在極細小的黃金顆粒外圍,成為基因子彈 利用散彈槍原理,以高壓氣體(如空砲彈)把子彈打入活體的細胞核中,達到基因轉殖目的 基因轉殖動物 將含有外源基因的重組DNA嵌入動物的受精卵或早期胚胎,將來發育成的動物 通常用顯微注射法或基因鎗等將外源基因注入受精卵內,待受精卵發育成個體後便會表現出外源基因的特性 利用轉殖動物生產具有醫療價值的產品 轉殖牛的乳汁中含有乳鐵素 轉殖山羊的乳汁中含有人類的凝血因子或血纖維蛋白酶 轉殖生長激素基因於鮭魚和鼠體內以促進生長 圖13-36 具有轉殖基因的山羊 圖13-37 轉殖生長激素基因的老鼠:兩隻老鼠同齡,左方體型較大者為帶有生長激素基因的轉殖鼠,右方體型較小者為正常型的老鼠。 基因轉殖微生物 基因改造細菌:能有效清除油船漏油的汙染問題 基因轉殖細菌能製造藥物: 胰島素 紅血球生成素(erythropoietin) 基因轉殖酵母菌:B型肝炎疫苗 第五節 遺傳工程 遺傳工程(genetic engineering) 藉人工剪接方法改變遺傳基因的相關技術,又稱基因工程 現代的生物學家研究,將來自不同生物的DNA置於試管中進行重組後,再將此重組DNA分子轉殖入宿主細胞,此技術屬遺傳工程科技之範圍 遺傳工程技術 農作物、牲畜品種改良,以得到抗蟲、抗殺草劑及具高產量、高營養價值的品種 判斷刑事案件及親緣鑑定 範圍:基因重組、基因擴增及基因轉殖 進階知識 第25號染色體 ── 粒線體DNA: 人類細胞核內的染色體總數是23對(46個),其中第1至第22對為體染色體,加上性染色體X及Y共有24種染色體 粒線體內的染色體被稱為第25號染色體,人類粒線體內的DNA都有固定的基因組合,由16569個鹼基對組成 母系遺傳 精卵受精時,精子只有頭部進入卵細胞,因其頭部不含粒線體 故異常的粒線體DNA只能藉由卵細胞遺傳,即所謂的母系遺傳而且所有的子代都會罹病 粒線體DNA 較常見的粒線體遺傳疾病是「粒線體肌病變症」 粒線體DNA除了可作為鑑定母系遺傳疾病之檢驗外,亦可做為親緣鑑定的參考。 13-5.1 基因選殖、基因擴增、基因轉殖生物 基因選殖 選殖系(clone):經由某些無性的方法來製造相同的複本 一個地下莖或根長出新芽,是以無性方式繁殖另一個自己 一個培養皿中菌落的成員也是選殖系,因為它們都是同
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