编号:微生物农药研究中心[菌种-100415], 共2页.docVIP

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编号:生物[菌种-100415], 共页 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 (0.9-1.0) 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计,实施实验,记载,分析清晰,结论清晰文献完整,发表水平 福建省农业科学院农业生物资源研究所 微生物农药研究中心 电话: 0591 传真: 0591 1.试验目的 土壤微生物群落是土壤生物区系中最重要的功能组分,土壤微生物不仅调节土壤动植物残体和土壤有机物质分解、养分转化及土壤结构的形成过程,而且土壤微生物本身还是土壤养分重要的“源”和“汇”,支撑着土壤肥力,是表征土壤质量的重要生物学指标[1,2]。土壤微生物群落结构的变化能敏感反映出土壤质量和健康状况,因此,对土壤微生物群落结构多样性的研究已引起国内外许多学者的关注。脂肪酸(FAME)谱图分析方法是一种快速、可靠而可重现的分析土壤微生物群落结构的方法,可用于表征在数量上占优势的土壤微生物群落,包括不可培养微生物。该方法最适合用作总微生物群落分析。而不是专一的微生物种类的研究。 2.试验方法 1、检测仪器 全自动微生物检测系统(sherlock MIDI) 2、脂肪酸提取前处理试剂 [试剂1 ] 0.2M KOH甲醇溶液 甲醇(HPLC grade) 300ml KOH 3.3666 g [试剂2 ] 1.0M冰醋酸溶液(分析纯) 冰醋酸 3.45 ml冰醋酸+56.55 ml超纯水(共60 ml) [试剂3 ] 正己烷 (HPLC Grade ) [试剂4 ] 1:1的正己烷与甲基叔丁基醚(MTBE)混合液 20 ml 正己烷(HPLC Grade) 10ml MTBE(HPLC Grade) 10ml 3、检测步骤 3.1 脂肪酸鉴定的前处理 脂肪酸鉴定的前处理工作主要为脂肪酸的提取,大体分为4个步骤,见表1 表1 脂肪酸提取步骤 步骤 具体方法 目的 脂肪酸的释放与甲酯化 取10g土样于50ml离心管中,加入15ml溶液1,斡旋震荡5min,并于37℃水浴温浴1h,每10min斡旋样品一次。 甲基化转化脂肪酸成甲基酯脂肪酸以增加脂肪酸的挥发性以供GC分析 中和溶液pH 加入3ml溶液2,充分摇匀。 脂肪酸的萃取 加入10ml溶液3,充分摇匀,2000r离心15min,打开管盖,利用干净的移液管取出每个样本的下层似水部分于干净的小三角瓶中,放入。 此过程要小心,宁可少取有机相,绝不可吸入甲醇相,否则会损坏气相色谱仪的色谱柱。 转移 在玻璃试管中加入0.5ml溶液4,充分溶解3-5min,转入GC小瓶,用于脂肪酸测定。 3.2上样,测定脂肪酸。 3.3数据库比对。 3.试验结果 LFN6 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFN5 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFN4 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFN3 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFN2 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFN1 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFC1 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFL2 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxpf 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxpj 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFp2 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFp1 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxp-60409 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxd-40409 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxd-20409 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxd-30409 猪粪 2010.08.12 栗丰 LFxd-10409 猪粪 2010.08.

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