家蚕肠道细菌群体调查与分析.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # #% ’ #() 年 月 日 #$$ ! ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! *+,-. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 家蚕肠道细菌群体调查与分析 ， ) ) ) ) ) # 袁志辉 ，蓝希钳 ，杨 廷 ，肖 杰 ，周泽扬 ) （西南大学农业部蚕桑学重点实验室微生物分室 重庆 !$$1) ） # （重庆师范大学生命科学学院 重庆 !$$$!1 ） 摘 要：目前，环境微生物中绝大部分是无法获得纯培养的。为了比较全面地了解家蚕肠道的细菌群体结构，研究 采用了非培养法和传统培养法相结合的方法进行调查分析。非培养法是先直接提取家蚕肠道中的微生物群体基 因组 ，用 法扩增细菌 基因，建立 文库；再以限制性片段长度多态性（ ）方法从文库中 JK* LMN )O ,NK* )O ,JK* NPQL 筛选可能不同细菌来源的克隆，并测定其核苷酸序列。将所获得的序列与R4C07CS 数据库进行0Q*O3 比对分析， 并通过系统发育分析，推测它们可能代表的细菌种属，以及对家蚕生长发育所起的作用。结果表明，家蚕肠道中的 细菌主要是节杆菌属、乳杆菌属、大肠杆菌属、芽胞杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属。它们在家蚕消化利用桑叶和 疾病预防中可能有着重要意义。非培养法和培养法均有各自的长处和不足，两者具有较强的互补性。 关键词：家蚕肠道细菌；群体基因组 ； ；非培养法 JK* )O ,NK* 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） T(/% * $$$)2#$( #$$ $#2$#%2$1 家蚕作为一种重要的经济动物与鳞翅目昆虫研 核糖体NK* 序列的比对分析为人们寻找微生物间 ［］ ［］ 究模型) ，具有生长快、周期短的特点。在幼虫期 1 的进化关系提供了一条更有效的途径 ，使人们能 #$ 多天时，家蚕除了本身具有消化食物的能力之 够绕过培养障碍，把研究对象深入到目前还未能培 外，肠道中种类繁多、数量巨大的微生物群体也对其 养的微生物领域中去。 食物的消化和营养的吸收起重要作用。同时，由于 本文先采用非培养法，直接提取家蚕肠道微生 长期驯化的结果，家蚕防病能力极其脆弱；