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检测马西尼罗热病毒抗体的重组E蛋白ELISA的建立.pdf
农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (2): 323~326
·研究论文 ·
检测马西尼罗热病毒抗体的重组 E蛋 白 ELISA 的建立 *
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姜 焱 张常印 王凯民 张敬友 唐泰 山 陈国强 张鹤晓
**, , , , , ,
(1.江苏出入境检验检疫局 ， 南京 210001;2.北京出入境检验检疫局 ， 北京 100021)
摘要：重组 质粒 转化大肠杆菌 （ ） ， 经 诱导， 外源基因 以包涵体的形式获
pETE BL21(DE3) 1.0mmol/LIPTG
得高效表达 。通过 Westernblot检测证明表达产物具有良好 的抗原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板 ， 建立了检
测西尼罗热病毒(WNV)抗体 的间接 ELISA 方法。结果表明 ， 抗原 的最佳稀释度为 8.6 g/mL， 血清 的最佳稀释度为 1100， 待检
滋 颐
血清阳性标准初步定为 ： ＞2.1× 的样品判为阳性。用此方法检测 了 450份血清样品， 结果全为 阴性。
关键词 ：重 组 E 蛋白； 马西尼罗热病毒抗体 ； 间接 ELISA
中图分类号: S188 文献标识码:A 文章编号:10061304(2007)02032304
Establishment ofaRecombinant E Protein ELISA for
DetectingtheAntibody ofEquine
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JIANGYan **,ZHANGChangyin ,WANGKaimin ,ZHANGJingyou ,
1 1 2
TANGTaishan ,CHEN Guoqiang ,ZHANGHexiao
Therecombinant pETEplasmid,which includesthe gene fragment ofthepartregion ofEquine (WNV)
sEprotein,was transformedinto BL21 (DE3),and expressed inveryhigh level asinclusion body after inducedwith
1.0mmol/LIPTG. TheindirectELISA for detectingWNV Eprotein antibodywas established after the antigenicity ofthe re
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