RNAi在植物中的作用机理及其应用研究进展.pdfVIP

第25卷 第1期 内蒙古民族大学学报(自然科学版) Vo1．25 No．1 2010年 1月 JournalofInnerMongoliaUniversityforNationalities Jan．2010 RNAi在植物中的作用机理及其应用研究进展 王永佳，陈永胜，李国瑞 (内蒙古民族大学 ，内蒙古 通辽 028000) [摘 要]本文综述了近年来有关RNA干扰的发现、作用过程及其作用机理，并介绍了RNA干扰在植物基因 功能、植物抗病毒 、作物品种改良等方面的应用． [关键词]RNAi；基因沉默；siRNA；dsRNA [中图分类号1Q78 [文献标识~-q)A [文章编号]1671—0185(2010)01—0054—05 TheProgressofRNA InterferenceTechniqueinPlant WANGYong-jia，CHENYong-shen，LIGuo-mi (InnerMongoliaUniversityforNationalities，Ton~iao028000，China) Abstract：ThediscoverandeffectofRNAinterferenceweresummarizedinthispaper，accordingtotheresearchprogress jntheseyears．InorttertoprovidereferenceofrtheutilizationtffsiRNA interference．siRNAapplicationinplantgene function，viralinfectionresistanceandcropqualityimprovementwerealsodiscussedinthispaper． Keyword：RNAinterference；Genesilencing；shortinterferingRNAinterference；double-strandedRNA RNA干扰 (RNAi，RNAinterference)是指在进化过程中高度保守的、有双链RNA(double—strandedRNA，dsRNA)诱发 的、同源mRNA高效特异性降解的现象，是真核生物中一种普遍存在且非常保守的机制，与真核细胞中许多重要生物学过 程密切相关．近年来，RNAi研究取得了突破性的进展 ，被(Science}}杂志评为2001年十大科学进展之一 ，并名列2002年十大 科学进展之首，正成为基因功能研究和基因治疗研究的热点． 1RNAj现象的发现 RNA干扰是华盛顿卡耐基研究院的AndrewFire和马萨诸塞大学医学院的CraigMello在研究秀丽新小杆线虫(C． elegans)反义RNA(antisenseRNA)的过程中发现．1998年，Fire等 发现双链RNA(dsRNA)~够特异性地阻断与其高度同源 的基因的表达后，RNAi就引起了植物学家的重视．同年Waterhouse等0就在植物中插入可以形成发夹结构的转录本的转基 因的重复序列，发现它可以有效地触发基因沉默．此后，RNAi现象陆续出现于真菌、果蝇、拟南芥等多种真核生物中 ，并 逐渐证明植物中的转录后基因沉默、共抑制及RNA介导的病毒抗性、真菌的抑制现象均属于RNAi在不同物种的表现形 式．之后Kalantidis等 将双链干扰RNA导人烟草中，成功地获得了抗病毒植株．之后越来越多的实验研究证明RNAi作用可 以有效地降解靶序列，引起基因沉默． 2 RNAi的作用机制 RNAi现象的遗传学与生物化学机制已日渐清晰．RNAi过程主要有起始和效应两个阶段．起始阶段有两个步骤 ：(1) dsRNA的导入，包括由外源导入或由转基因转座子、病毒感染等各种方式引入dsRNA；(2)导入的dsRNA被Dicer切解为 21—23nt的siRNA．在效应阶段 ，双链的siRNA首先被包裹进一个多蛋白复合体中，与细胞源性的某些酶和蛋白质形成复合 体RISC．在ATP存在的情况下，RISC被激活，双链siRNA打开，释放出正义RNA链