PPARγ2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定.pdfVIP

2556 重庆医学2008年 11月第 37卷第 22期 · 论 著 · PPAR 基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 吴永宏，毕 扬△，黄佳袢△，吴明军▲，冯 涛 (重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 400016) 摘 要 ：目的 构建携带 PPAR7z基 因的腺病毒载体。方法 采用PCR技术从 pcDNA3质粒 中扩增小鼠PPAR7z基 因，将 PPAR72基因亚克隆至质粒穿梭载体 pAd—Track—CMV。用脂质体 (1ipidbody)转染法 (infectionprotoco1)将重组腺病毒 pAd— Track-PPAR7一CMV和 pAdEasy1共转染293细胞 ，确定转染效率。结果 RT—PCR检测结果显示腺病毒 Ad—PPAR72PCR产 物约为470bp；用抗 PPAR7单克隆抗体进行 Westernblot检测为阳性，感染的重组腺病毒载体在 L02细胞 中PPAR7 有较高的 稳定表达 。结论 成功构建携带小鼠PPAR7z基 因的腺病毒栽体。 关键词