输注人PBMC建立人-鼠异种移植物抗宿主病模型1.pdfVIP

· 1658 · 中国免疫学杂志 2014年第 3O卷 doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2014．12．015 输注人 PBMC建立 “人一鼠异种移植物抗宿主病模型① 陈 俊② 张 伟③ 翁秀芳 陆盛军 吴雄文 梁智辉 (华中科技大学同济医学院免疫学系，武汉 430030) 中图分类号 R329．4 文献标志码 A 文章编号 1000-484X(2014)12-1658D4 [摘 要] 目的：摸索 X-GVHD模型的合适小 鼠品系 ，建立稳定的 “人一鼠”X—GVHD模型。方法：选取 了裸鼠、NOD／ SCID经亚致死剂量 射线全身照射后，腹腔输注健康人外周血单核细胞 (PBMC)建立异种X—GVHD模型。通过检测人 T细 胞在模型鼠外周血、组织、器官中的浸润情况等指标(采用流式细胞术和免疫组化技术)，比较两种模型鼠中人免疫细胞的浸 润率和各组生存时间，从而确定建立X—GVHD模型的合适小 鼠品系，并摸索人PBMC的输注途径和合适细胞量，以及观察免 疫细胞表型变化与功能的最佳时间窗口。结果：NOD／SCID鼠更适合诱导 “人一鼠”X-GVHD模型的小鼠；腹腔输注途径和尾静 脉输注途径对建立 “人．鼠”X-GVHD模型无明显差异 ；腹腔输注5~10以上人 PBMC可以成功建立 “人-鼠”X-GVHD模型。在 采用优化后的实验条件建立模型中，监测人T细胞表型动态变化与功能的最佳时间窗 口为7～11d；模型鼠的平均生存时间为 (14．16+1．77)d。结论：NOD／SCID鼠通过腹腔注射5×1O以上人PBMC可以成功建立 “人-鼠”X-GVHD模型，7～11d为监测 人T细胞表型动态变化与功能的最佳时间。 [关键词] PBMC；器官移植 ；异种移植；移植物抗宿主病 Transplanthuman PBM C to establish a ¨hmu an—mouse¨xenogeneic graft- versus．hostdiseasemodel CHEN Jun，ZHANG Wei，WENGXiu-Fang，LU Sheng—Jun， Xiong—Wen，LIANG Zhi-Hui．Departmentof Immunology，TonediMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China [Abstract] Objective：Toexplorethesuitablemousestrains，andestablishstable”human—mice”X—GVHDmode1．Methods： Thisstudy selected the Nude Mice and NOD／SCID，na d gave them sublethaldose of 一ray irradiation whole body，and then intraperitonealtrnasplantedhumna peripheralbloodmononuclearcells(PBMC)toestablishxenogeneicacutegraft-versus—hostdisease mode1．BydetectionofhumanTcellsinthemicestailvenousblood，tissues，organsoftheinfiltrationandotherindicators(Byflowcy— tometryandimmunohistochemistry)．wecomparedthehumanimmunecellinfiltrationratesinthetwomousemodelandreeordedthe survivaltime．Finally，wedeterminedtheappropriatestrainsofmicetoestablishX—GVHD．Optimizationmeansweretransferwaysand theappropriateamountofhumanPBMC，andthebesttimetoobservethechangesofTcellphenotypeandfunction．Results：TheNOD／ SCID mousewasmoresuitableforinducing”human—mouse”X·GVHDmode1