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中国临床康复笫8参第,7期2004一06—15出版 兰!堕坐—■o?型竺!业唑虫!!竺!!!,!!竺!!三竺!生!!型!!! 3327 ·综述· 组织工程化组织的低温冷冻保存研究岫 罗晓中,杨志明 罗晓中,杨志明,四川大学华西医院修复重建外科研究室,四川省成都 伤的问题。 市 61004l 1.2 低温冷冻保存的负反应冷冻损伤是活体组织冷冻保存最 罗晓中☆,男,1968年生,四川省自贡市人,汉族,四川大学华西临床医 学院博士在读,主治医师,主要从事创伤修复、骨组织工程学研究。 主要的负反应,其原因现在尚不清楚,可能主要是冻融时冰晶对 luoxiaozho“g@mail.china.com 细胞所致的机械性和渗透性损伤。它们表现在两个方面:①慢 电话:+86.28 通讯作者:杨志明,四川大学华西医院修复重建外科研究室,四川省成 速冷冻过程中,细胞外液的水分不断结晶,未冻的游离水减少, 都市 61004lluoxiaozhong@mail.china.com 造成细胞内外渗透压不等,使得大量的水分由胞内向胞外渗出, 电话:+86—28 逐渐导致细胞内渗透压升高,造成“溶质性损伤”。②快速冷冻 国家自然科学基金重点资助项目(3983叭00);国家高技术研究发展计 划(863计划)资助项目(2002AA205011)+ 过程中,细胞内的水分尚未转移到细胞外,而细胞内外同时结 中图分类号:lt318文献标识码:B文章编号:167l一5926(2004)17—3327—03 冰,细胞内冰晶机械性地破坏细胞核与细胞器而致细胞损伤,称 收稿日期:20()3一lO—17修回日期:2004—02—10(26/GY) 为“胞内冰晶损伤”。除压迫性损伤外,在其复温过程中如复温 摘要:低温冷冻保存是活体组织长期保存的一种有效方法,主要通过降 速率较慢,则会形成再结晶加重细胞损伤。多数学者认为生物 低细胞的代谢率来起到保护作用,冻伤是低温保护最大的负反应,其原 因可能为冰晶所致的机械性损伤和渗透性损伤,组织与细胞冻伤的防 组织在冷冻时所受的损伤主要是由于“溶质性损伤”所产生的渗 治是低温冷冻保存成功的关键,目前研究主要集中在降温与复温速率 透压、电解质含量以及pH的改变作用于细胞膜脂质而导致细 的选择、防冻剂的应用和玻璃化保存等3方面。组织工程化组织是功能 细胞与支架材料体外构建的具有生命的组织,同样实用于低温冷冻保 胞膜的渗漏。在复温时,这一渗漏使大量水分进入胞内,导致细 存,已证实经过低温保存的组织工程皮肤具有良好的效果,但其他组织 胞水肿而死亡,称为渗透性休克。另外,有研究证明氧自由基是 工程组织在低温保存方面的研究还需进一步深入,特别是防冻剂配方 冻融损伤的原因之一,在冷冻前应用氧自由基保护剂可减轻冷 组合和防冻剂含量、降温和复温程序与速率以及降温所至温度的选择 等。 冻损伤。贾晓明等【51研究中发现:以细胞悬液形式保存的细胞活 主题词:生物医学工程;组织保存;低温保藏 力在一40℃时仍可达到50%左右,而以单层则只有10%左右, Luo ZM for惦sue tissue 他们由此认为细胞连接是低温保存过程中产生损伤的一个关键 XZ,YangCryoprese~alionengIneeredZb“g茸∞£lM^她增 ‰,埘z 2004,8117I3327—9IChinol

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