中国根霉12#产生的抗生物质对枯草芽孢杆菌的作用方式.pdfVIP

·452· 中国根霉12#产生的抗生物质对枯草芽孢杆菌的作用方式 贾素娟1路福平2杜连祥2许文思1 (1上海医药工业研究院，上海200040； 2天津科技大学食品工程学院， 天津300222) 摘要： 枯草芽孢杆菌等芽孢杆菌属的细菌是食品发酵工业中常见的污染菌。中国根霉12#可产生一种 对芽孢杆菌属有强烈抗菌作用的抗生物质。本文利用抗生物质溶液浓度梯度培养法和透射电镜观察法研究 了该抗生物质对枯草芽孢杆菌的作用方式。抗生物质溶液浓度梯度培养法的结果表明，当抗生物质的浓度达 9000U／ml时，枯草芽孢杆菌的延滞期无限变长。透射电镜的观察结果表明该抗生物质主要作用于细胞壁，使 细胞内容物溢出。由此可知，该抗生物质对枯草芽孢杆菌的作用方式为溶菌。 关键词： 中国根霉12#；抗生物质； 枯草芽孢杆菌IF03335；溶菌 中图分类号：T$201．3 文献标识码：A 中国根霉12#是1992年由天津科技大学王昌禄 等[13从我国南方小酒药中分离得到。该菌可产生一种 素琼脂(2％)，待其冷凝后，放置数个无菌牛津杯，并按 对芽孢杆菌属细菌有强烈抗菌作用的抗生物质，该物 一定次序排放整齐。 质对其它革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌、乳脂链球 上层：将分装于大试管中的9ml固体检测培养基 菌等也有作用。由于该抗生物质可抑制枯草芽孢杆菌 等食品发酵工业中常见的污染菌。因此，有望开发为新 =0．60)，摇匀后迅速倒入已制备好底层的培养皿中， 型生物防腐剂。 待上层凝固后，取出牛津杯。 本文以枯草芽孢杆菌为指示菌，深入研究了该抗 (2)抗生物质活性检测用微量取样器取所得的 生物质对指示菌的作用方式，为开发该抗生物质进行 抗生物质溶液50肛I，注入检测平板上层的琼脂孔中， 广泛应用提供理论基础。 25℃培养lOh，观察并测定抗菌圈面积。 1材料方法 (3)抗生物质活性单位的定义每毫升样品在确 1．1材料 定的检测平板上，能产生l平方毫米净抗菌圈面积为 1．1．1 chinesis 菌种 1个活力单位U。 中国根霉12#(Rhizopus N012)由天津科技大学分离。枯草芽孢杆菌(Bacillus计算公式：U一[(S1一s2)／v]×1000 subtillis IF03335)由天津科技大学提供。 式中：S1——抗菌圈面积(ram2) 1．1．2培养基 指示菌生长培养基：I。B液体培养 S2——孔穴面积(mm2) 基[23；抗生物质活性检测用固体培养基：在I。B培养基 V——加样量(肚1) 中，琼脂粉0．6％。 测量方法：利用抗生素效价测定仪，可直接测得抗 1．2方法 所产生的抗菌圈面积(平方毫米)。 1．2．1抗生物质的制备将培养48h的发酵液离心 1．2．3指示菌生长曲线的绘制 取一环枯草芽孢杆 (3500r／min，15min)除菌体，得到上清液。首先经70％ 硫酸铵盐析，再通过半透膜透析除盐，后经CM一纤维 素柱层析、Sephadex—G75柱层析，得到经HPI。C和薄 板层析证明为单一组分的抗生物质。 稀释10倍后测A。。。。。，绘制指示菌生长曲线。 1．2．2抗生物质活性测定 1．2．4抗生物质溶液浓度梯度培养法确定抗生物