中药复方连黄消除沙门氏菌耐药性及对其生物学特性的影响.pdfVIP

第3l卷第1期 延边大学农学学报 V01．31NO．1 Journalof ScienceYanbian Mar．2009 2009年3月 Agricultural University 中药复方“连黄消除沙门氏菌耐药性及对其生物学特性的影响 王润， 李杨， 王爽， 鞠玉琳’ (延边大学农学院，吉林龙井133400) 摘要：通过小鼠急性毒性实验、细菌在小鼠体内各器官中的动态分布、细菌体外生长曲线的测 定及耐药消除稳定性实验，研究耐药性消除对沙门氏菌生物学特性的影响．结果表明，中药复 方“连黄”消除沙门氏菌耐药性后其毒力降低，同时使其在体内存活与扩散的能力显著降低． 关键词：中药复方“连黄”；耐药性；消除；生物学特性 中图分类号：$853．7 文献标识码：A 多年来，抗生素应用于畜牧兽医临床和生产使许多疾病得到控制和治疗．然而随着抗生 素的不断应用和不合理使用，多数病原菌对抗生素产生耐药性，且耐药水平不断提高，对人 类战胜病原菌提出了严峻挑战[1]．然而耐药性消除可使耐药菌恢复其野生型状态，成为研究 治疗疾病以及开发新药的途径之一．试验通过小鼠急性毒性实验、细菌在小鼠体内各器官中 的动态分布、细菌体外生长曲线的测定及耐药消除稳定性实验初步研究中药复方“连黄”消 除沙门氏菌耐药性及对其生物学特性的影响，为进一步研究耐药性抑制剂提供理论依据． 1材料与方法 1．1 材料 一 试验动物 昆明种小白鼠，体重2025 g，雌雄各半． 菌种与药物 耐药沙门氏菌D01(延边大学农学院药理实验室自行诱导)；耐药沙门氏 菌D017(延边大学农学院药理实验窒采用“亚抑菌浓度”的中药复方“连黄”对诱导菌种作用 后获得)；卡那霉素(购自北京华美生物制品公司)． 1．2仪器设备 超净工作台(上海浦东荣丰科学仪器有限公司)；U一1800紫外分光光度计(日本天美公 司)；ES一315高压灭菌器(日本TOMY公司)． 1．3 方法 1．3．1小鼠急性毒性试验 1)沙门氏菌培养将耐药沙门氏菌D01和耐药沙门氏菌D01’接种于灭菌LB培养基 h．用U一1800紫外分光光度计，于600 内，37℃振荡培养12 nm处测定菌液浓度． 琼脂培养基中(每个浓度设3次重复)，培养过夜，直至长出单个菌落后计数． 收稿日期：2008一lO一17基金项目：延边大学本科生科研基金项目． 作者简介：王润(1986一)。女．青海西宁人，边大学农学院动物医学系，在读学士．鞠玉琳为通讯作者， Tel：0433—3264682．E—mail：ylju@ybu．edu．cn 万方数据 68 延边大学农学学报 第31卷 3)注射剂量的确定取小鼠45只，随机分成9组，每组5只，包括1个对照组．采用 0．2mL／10g剂量腹腔注射接种于小白鼠[纠．各试验组接种后禁食1h，恢复常规管理，连续 d． 观察15 4)观察及记录及时观察小鼠的精神、食欲、饮水及运动情况，并记录小鼠的死亡数 目、死亡时间及有无中毒现象等．试验数据按以下公式计算：LD。。：1LD。。一X。一d(∑p一 g 0．5)． 1．3．2细菌在小鼠体内各器官中的动态分布取10只小鼠，随机分成2组，分别腹腔注射 剂量为1．0×107CFU的D01和D01’．参照朱俊等[3]的方法进行． 1．3．3细菌体外生长曲线的测定参照周子原等[4]的方法进行． 1．3．4耐药消除稳定性实验 参照陈月燕等[5]的方法进行传代． 2结果与分析 2．1小鼠急性毒性试验结果