传染性法氏囊病病毒检测系统的建立.pdfVIP

　中 国 兽 医 学 报 　2 00 8 年 9 月 　第 28 卷 　第 9 期 　Chin J Vet Sci 　Sep t . 20 08 　Vol . 2 8 　No . 9 　 5101 传染性法 氏囊病病毒检测系统的建立 1 2 3 1 1 1 2 ,3 王忠灿 ,王永山 ,唐雨德 ,谭维国 ,施正 良 ,欧阳伟 　( 1. 南京军区军事 医学研究所 南京军区疾病预防 控制中心 , 江苏 南京 210002 ;2 . 江苏省农业科学院 兽医研究所 国家兽 用生物 制品工程 技术研 究中心 ,江 苏 南京 2 10014 ;3 . 南京农业大学 动物医学院 ,江苏 南京 2 100 9 5) 摘要 :为了建立传染性法 氏囊病病毒( IBDV ) 检测系统 ,本试验在同一个试验技术平台上对 9 种 IBDV 检测方法进 行了比较分析 。IBDV 野毒株盲传 4 ～5 代可适应于鸡胚 和鸡胚 成纤维细胞 , 死亡胚体水肿 、出血 ,病变 细胞圆缩 、 脱落 。4 个血清 Ⅰ型 IBD V 毒株 ,用交叉中和试验可进一步分为 3 个血清 亚型 。用 R T2PCR/ SSCP 技术分析 4 个 毒株 , 扩增产物的电泳迁移率有差异 。A GP 、间接 E ISA 、夹 心抑制 E ISA 以及中和试验等 4 种方法同时检测不 同来源血清样品中的 IBD V 抗体 ,其他 3 种方法比 A GP 具有更 高的敏感性 ,敏感度相差 104 倍 。用 A GP 检测法 氏 囊组织样品 , 抗原效价可达到 1 ∶10 , 而细胞培养物和病鸡粪便则没有出现沉 淀线 ;3 种样品用夹 心 E ISA 、R T2 PCR 、cDN A 探针斑点杂交 、R T2PCR/ SSCP 检测以及病毒分离等 5 种方法检测 ,均为阳性 。 关键词 :传染性法 氏囊病病毒 ;检测系统 中图分类号 :S852 .6 5 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 : 100 524 54 5( 2008) 09210 15205 Develop men t of t he detect ion syst em f or infect ious bur sal disea se vir us 1 2 3 1 1 1 WA N G Zhon g2can , WA N G Yon g2sha n , TAN G Yu2de , TAN Wei2guo , S H I Zhen g2lian g , OU Y2 AN G wei2 , 3 　( 1. H u a d on g R ese ar ch Inst it ute o f M e d ic al B i otech nics , Center f o r D ise a se Cont r ol an d Pr eventi on of N a nj i n g Comm a n d , N anj i n g 2 10 002 , Chi n a ; 2 I nst it ute of Veter i na r y M e d i2 ci ne , J i an gs u Ac a de