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改进的同位素标记法标记蛋白质多肽.pdf
38 (FENXI HUAXUE) 1
第 卷 分析化学 研究简报 第 期
2010 1 Chinese Journal of Analytical Chemistry 91 ~ 94
年 月
18 O
改进的 同位素标记法标记蛋白质多肽
1 ,2 1 1 ,2 1 ,2 * 1 ,2
赵焱 卢庄 贾伟 应万涛 钱小红
1 ( , , 102206)
蛋白质组学国家重点实验室 北京蛋白质组研究中心 北京
2 ( , 100850)
军事医学科学院放射与辐射医学研究所 北京
18
O ——— ,
摘 要 针对 同位素标记反应两个重要影响因素 肽段分散度和胰酶灭活方法 进行了标记条件的改
18 TM
。 H O Rapigest SF , -
进和灭活方法的优化 在 2 中加入 助溶剂并微波辅助加热 使α 酪蛋白胰酶酶切肽段的标
18 16
(O / O 99% )。 , ,
记效率得到明显改进 峰面积比值 标记后 对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活 使标
, 6 d 。
记后的肽段稳定性显著提高 放置 不发生回交反应 对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后
: 。
的质谱实验结果表明 优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽
18
O ; ;
关键词 同位素标记 多肽 蛋白质组
1 引 言
,
定量蛋白质组学通过批量观察正常与疾病细胞或组织在蛋白质表达谱上的差异 从整体水平上规
18
, 。O
模化筛选和发掘与疾病相关的蛋白 为致病机理研究和临床应用提供重要参考信息 同位素标记技
[1 ~ 5 ] 16
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