Ms4000U在蛙心灌流及药物对离体蛙心的作用实验中的应用.pdfVIP

维普资讯 牡丹江医学院学报 2007年 第 28卷 第6期 · 78 · JOURNAL OF MUDANJIANC MEDICAL COLLEGE Vo1．28 NO．6 2007 分淋巴管与血管。近年来，由于淋 巴管的特异性标记物如 呈深蓝色，基底膜呈蓝色。血管因富含基底膜而呈蓝色，可 LYVE一1，prox一1，podoplanin和D2—40等的发现，使得应 见血管形态较规则、管壁较厚 、内皮下可见很强的连续线状 用免疫组织化学显色法区分淋巴管与血管变得更为客观，但 的染色带，光镜下较易区分 ，而且腔内含数量不等的伊红复 以上反应条件限制较严格，试剂较贵，很难应用于 日常教学 染呈红色的血细胞。毛细淋巴管和淋巴管，由于缺乏基底 用淋巴管的显示，基底膜特殊显色反应一般用于观察毛细血 膜，着色浅淡 ，只呈现管壁的大体轮廓，可见管腔大，形态不 管 ，用此法鉴别血管与淋巴管尚未见报道。本文就基底膜特 规则，管壁薄，内皮细胞核突向管腔 ，腔内常有均匀一致的淋 殊显色反应显示淋巴管和血管的方法进行了尝试。 巴液，偶可见淋巴细胞，鉴于以上特点 ，很容易把淋巴管与血 1 材料和方法 管区分开 (1)。 ’ 1．1 实验动物及取材 大 鼠5只，重 250—300g。常规麻 3 讨 论 醉、开胸，在肺脏随机取2块组织 ，切成约0．8cm ×0．8cm × 根据毛细淋巴管缺乏或仅有少量不连续的基膜的结构 0．5cm，放入 Zenker固定液 固定 48h，流水充分冲洗，经 特点，许多学者试图通过基底膜的染色达到区分毛细淋巴管 80％、9o％、100％酒精逐步脱水 ，二甲苯透明，石蜡包埋，修 和毛细血管的目的，并用抗基膜抗体进行了某些器官淋巴管 块 ，切片5m，贴片，烤片，备用染色。 免疫组化染色的研究，取得了成功 。对此 ，我们应用针对 1．2 苯胺蓝复合染料基底膜染色法 石蜡切片常规脱蜡至 基底膜的特殊染色也进行了肺淋巴管染色的探讨。在经基 水。入0．5％的碘酒精溶液中脱汞，再入0．25％的硫代硫酸 底膜特殊染色的切片上，可在较大的血管见到很强的连续线 钠溶液中脱碘。蒸馏水洗 3—5min。入苯胺蓝染色液中染 状的内皮下染色带，淋巴管由于缺乏基底膜，着色浅淡，较易 色5min。95％酒精分色 1min。0．5％伊红酒精溶液中复 区分。 染，1min。70％酒精分色。常规脱水、透 明、加拿大树脂封 在光镜下HE染色很难确定淋巴管或血管。在 电镜下 片。苯胺蓝染色液含有 ：0．5g苯胺蓝 ，lOOmL0．1％磷钨酸 能观察到毛细淋巴管的细微结构，但不能估计较大组织块内 水溶液 。 淋巴管的分布和密度。酶组织化学和免疫组织化学显色法 虽然成功地鉴别血管和淋巴管 ，但组织颜色背景不 良，细胞 轮廓欠佳，且条件限制较严格，试剂较贵。而针对基底膜的 苯胺蓝复合染料染色法 ，在鉴别血管和淋巴管方面，已经达 到了酶组化法和免疫组化法两方法的区分效果 ，不但定位准 确，组织结构保持 良好，细胞轮廓清晰 ，组织背景层次较佳， 而且方法简便，成本低廉，易于操作，对于部分实质性或空腔