Primary Culture of Alveolar Epithelial Type Ⅱ Cells and Its Bionomic Study.pdfVIP

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2017-08-10 发布于河北
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Primary Culture of Alveolar Epithelial Type Ⅱ Cells and Its Bionomic Study.pdf

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维普资讯 JournalofHuazhongUniversityofScienceandTechnolog) [Medsclj DOll0．1007／s11596—007—0608一x 27(6)：653—656，20o7 653 PrimaryCultureofAlveolarEpithelialTypeIICellsandIts BionomieStudy SHIXuemei(史雪梅)，ZHANGHuilan(张惠兰)，XIONGShengdao(熊盛道)，ZHENGuohua(甄国华)， XIONGWeining(熊维宁)，ZHANGZhenxiang(张珍祥)，XUYongjian(徐永健)，HUQiongjie(胡琼洁)， ZHAOJianping(赵建平)，NIWang(倪望) ResearchInstituteofRespiratoryDiseases，DepartmentofRespiratoryDiseases，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan43O030,China Summary：Toestablishabettermethodofprimarycultureforalveolarepithelialtype IIcells(AEC II)andtostudyitsbionomics，alveolraepithelialtpye IIcellswereisolatedbydigestionwiht trpy— sinandcollagenase．which werethenpurifiedbyplated intocultureflaskcoated withratimlTIU— noglobulinG ThepurifiedAEC I1wereidenfifledbyalkalinephosphatasestaining，electronmi— croscopy,immunocytochemicalstainingofpulmonarysurfactantproteinA (SPA)．TheSPAexpres— sionandtransfectionchraacteristicswere compraedwiththoseofA549cellline．Th eresultsshowed thatAEC IIcouldbe isolatedbydigestionwithtrysinandcollagenaseandpurifiedbyadhesivepu— riflcafionbyusingIgG withayieldofabout2—3×l0，andapurityofabout75％—84％．Cellscould bequicklyidenfifledwimAKPstaining．AECI1weredifferentfromA549celllineintermsofSPA expressionnadtransfecfionchraacteristics．Itisconcludedthatadhesivepurification withIgG can improvethepurityofAECII．nadAKPsatiningissimpleincellidentification．AECIIcannotbe completelyreplacedbyA549cel