益肝康对肝纤维化SD大鼠HSCα—SMA与TIMP—1阳性表型的作用.pdfVIP

寒沙门菌为载体构建的Hp疫苗，还是Hp全菌超声粉碎抗原加霍乱毒素疫苗，均诱导小鼠产 生TM型保护性免疫应答，同时对免疫后胃炎进行了探讨，发现免疫后胃炎的强弱程度与免 疫宿主和攻击菌量有关，而与Hp疫苗类型及免疫途径无关。当然，从本次大会论文交流的 情况也看到我国在Hp研究方面与国际上仍有相当差距，主要表现在临床研究方面设计严谨 的、大样本的、前瞻性研究不多．因此能拿到国际会议形成共识的中国资料极少，基础研究 方面有创新的、有深度的研究较少。 这次大会既传递了国际上11p研究的最新动态及临床处理的共识意见，又交流了全国各 地的研究成果。从Hp培养成功算起，Hp的研究已历经20年，全国Hp会议开到第三届，今 后Hp研究的前景如何?时至今日，很多能够解决的问题已经解决得差不多，不能解决的问 题还是未能解决，现在大家都在调整自己的研究方向，寻找突破点。本次大会专题报告中提 到的当今研究的新技术在Hp研究的应用很有启发，将来的研究肯定必须有更多专门从事基 础研究的微生物学、病理学、分子生物学等不同学科的专家的介入，今后Hp的研究也肯定 将会是更高难度的挑战。 (胡品滓、萧树东、张万岱、胡伏莲整理) 肝、胰、胆病 表型的作用 河北医科大学第二医院(050000)姚希贤蒋树林吕涛宋梅孙泽明 肝星状细胞(hepaticstellatecell，ttSC)的活化是各处肝脏损伤因素至肝纤维化的中 muscleactin，Ⅱ～SMA) 心环节，活化的ttSC以细胞浆内表a平滑肌机动蛋白(a—smooth matrix，ECM)。在HSC活化的早期阶段，tlSC释放基质金属蛋白酶(matrixmetalloprote inhibitorsof 强，但是由于HSC合成的组织金属蛋白酶抑制物1和2(tiSstle and一2，TIMP—i metalloDroteinases—land一2)增强，使调节的净效果为下调基质胶原的降 解，从而使胶原过度沉积。可见a—s^iA、TIMPs是肝纤维化形成中各种调因子的靶点。抗 肝纤维化研究也宜以此作为靶点，才可有效地防止或逆转肝纤维化。已有研究证实活血化瘀 中药对肝纤维化有效，但其抗肝纤维化的机制是否是作用在上述靶点上，目前尚未见此方面 的报道。为此，本研究在前述研究的基础上，进一步研究活血化瘀中药益肝康在a—s姒和 TIMP一1两个靶点上的抗纤维化机制。 一、材料与方法 模型预防：⑤Ps模型预防；⑥CClt模型治疗：⑦Ps模型治疗。其中①中4只给与纯制花生 油皮下注射，另外4只给与生理盐水，剂量和方法同实验组。②④⑥给与40％CCl。纯制花 鲜无菌混合血)，每只2ml，腹腔注射，每周2次，共10周。预防组均于制模开始前4周即 给与含10％益肝康配方中药的饲料(河北医科大学动物实验室制)直至造模结束时恢复正常 饲料。治疗组在制模结束前4周开始给与上述含药饲料，至制模结束后10周恢复正常饲料。 治疗组和预防组给含药饲料时间均为14周。所有动物均饮用我院制剂室制灭菌水，饲养温 肝脏，部分液氮冻存备用，部分中性甲醛固定48小时，HE、Masson染色观察肝组织病理。 2、n—s姒和I型胶原免疫组织化学病理n—s姐和I型胶原免疫组织化学检查采 用免疫组织化学sP法。载玻予先以多聚赖氨酸处理，行病理切片，60。C烤片6～8小时，酒 精水化，3％Hzoz灭活内源性过氧化物酶30分钟，复合消化液修复10分钟，正常山羊血清 封闭2小时，分别于不同切片上滴加小鼠抗a—shIA单克隆抗体和兔抗I型胶原多克隆抗体 (两种抗体均购武汉博士德公司)，4℃过夜，PBS冲洗3次，滴加生物素化二抗工作液，37 ℃孵育15分钟。PBS冲洗3次，滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液，7C孵育15分钟。 PBS冲洗3次，DAB显色，自来水冲洗，轻度复染，封片。 3、T1MP一1原位杂交TIMP一1原位杂交试剂盒购于武汉博士德公司，按说明书操作。 PBS室温 载玻予先以多聚赖氨酸处理，行冰冻切片，含0．1％DEPC和3％多聚