细胞生物学7.3课件.pptVIP

* * 第三节 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输 一、信号假说与蛋白质分选信号 细胞中免疫球蛋白N端比分泌到细胞外的N端多出一段aa序列 信号假说（G. Blobel D. Sabatini,1975） ——分泌性蛋白N端作为信号肽，指导分泌性蛋白到内质网上合成，然后在信号肽引导下蛋白质边合成边通过易位子蛋白复合体进入内质网腔，在蛋白质合成结束之前信号肽被切除。 所有蛋白的合成起始都在基质中，之后有些靠信号肽的作用转移到糙面内质网上。 蛋白质的定向转运（分选） 1. 信号假说 The 1999 Nobel Prize in Physiology or Medicine Günter Blobel 2. 蛋白质分选信号 细胞内合成的蛋白质、脂类等物质之所以能够定向的转运到特定的细胞器取决于两个方面：其一是蛋白质中包含特殊的信号序列（signal sequence or targeting sequence ），其二是细胞器上具特定的信号识别装置（分选受体，sorting receptor）。 信号序列/肽 信号识别颗粒 颗粒受体(停泊蛋白) signal recognition particle SRP docking protein DP signal peptide 蛋白质N端 核糖核蛋白复合体 细胞质中 内质网膜上 没有严格的专一性，目前尚未发现相同的信号序列 与新生肽信号序列、核糖体、DP结合 与SRP结合 细胞类至少存在两类蛋白质分选的信号： 信号序列（signal sequence）：存在于蛋白质一级结上的线性序列，通常15-60个氨基酸残基，有些信号序列在完成蛋白质的定向转移后被信号肽酶（signal peptidase）切除。 信号斑（signal patch）：存在于完成折叠的蛋白质中，由几段信号肽形成的三维结构，该三维结构成为蛋白质分选的信号，被特异的蛋白质进一步识别从而指导蛋白质的转移与定位。 两类蛋白质分选信号 分泌性蛋白的合成 start-transfer peptide stop-transfer peptide 跨膜蛋白的合成 开始转移序列——信号肽，引导肽链穿过内质网膜 停止转移序列——肽链与内质网膜高度亲和序列 多次跨膜：含多个开始和停止转移序列 Pr在基质游离核糖体上起始合成 合成完整多肽 基质中 进入线粒体、叶绿体、核等 与SRP结合，肽链停止延伸 SRP与DP结合，核糖体与易位子结合 SRP脱离，肽链延伸 易位子孔道打开，信号肽穿过ER膜 引导肽链进入ER 切除信号肽 肽链继续延伸，直至完成 翻译后转运 共翻译转运 也在信号序列指导下 需要能量 需要其他蛋白的帮助促进正确折叠 二、蛋白质分选的基本途径与类型 分选途径： 翻译后转运途径：蛋白质在细胞质基质中合成，并直接转移到细胞器或细胞质基质的特定部位 共翻译转运途径：蛋白质在细胞质基质中起始合成，然后转至内质网中完成合成，再经过高尔基体进行转运。 蛋白质转运类型 蛋白质跨膜转运 膜泡运输 选择性门控转运 细胞质基质中的蛋白质的转运 细胞质基质中合成的蛋白 细胞质基质中合成的蛋白 蛋白质被选择性地包装成运输小泡，定向运输 与细胞骨架相关 内质网 线粒体、叶绿体、过氧化物酶体 内质网中合成的蛋白 高尔基体 细胞质膜 溶酶体等 细胞核 核孔复合体 细胞质基质中合成的蛋白 基质中的转运 三、膜泡运输 内质网中合成的蛋白 高尔基体 细胞质膜 溶酶体等 1. 内质网→高尔基体 COP II有被小泡介导的细胞内顺向运输 COP II包被 Sec13p Sec31p Sec23p Sec24p Sar1p 调控包被的组转和去组装 COP II有被小泡的组装和转运 内~膜上“受体” 选择性跨膜蛋白 辅助因子 v-SNARE GTP结合蛋白 Sar1p 调控包被的组装与去组装 高~膜上受体 t-SNARE COPII有被小泡的组装 2. 高尔基体→内质网 COP I有被小泡介导的细胞内膜泡逆向运输 CGN →ER COP I 7个亚基 ARF GTP结合蛋白，调控包被组/去 运送的物质：膜脂、内质网驻留蛋白、v-SNARE等 内质网驻留蛋白回收示意图 如何实现蛋白的驻留？ 形成大的复合物，不能进入转运泡，防止出芽运输 驻留蛋白C端回收信号 KDEL回收信号 二硫键异构酶、分子伴侣等 KKXX回收信号 SRP受体等 其他的回收信号 3. 高尔基体→溶酶体、胞内体等 网格蛋白有被小泡介导 GTP结合蛋白 dynamin 发动蛋白 ARF 4. 高尔基体→细胞质膜 包被蛋白未鉴定 高尔基体TGN是网格蛋白有被小泡的发源地