省淳中高二生物深度研课学案.doc

省淳中高二生物深度研课学案 【课 题】 分离特定的微生物并测定其数量1 【课标要求】 1、进行微生物的分离和培养 2、测定某种微生物的数量 3、研究培养基对微生物的选择作用 【学习目标】 通过学习、讨论、实践，掌握分离、纯化微生物的方法 【教学过程】 知识点一 、涂抹平板法或混合平板法分离细菌 （一）依据：菌落、菌苔的特征 1、菌落：单个微生物肉眼_____________，单个微生物在适宜的固体培养基_________或__________生长、繁殖到一定程度，可以形成肉眼_________、有一定____________的子细胞生长群体，称为___________。 2、菌苔：当固体培养基表面许多菌落连成一片时，便成为_____________。 3、不同微生物在特定的培养基上生长形成的___________或____________一般都具有固定的特征。 （二）分离方法：主要有 和 两种 知识点二 、选择培养分离 （一）依据：因为不同微生物有 或对 有不同的敏感性。 （二）方法：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之 ，而抑制 。这种通过 进行微生物纯培养分离的技术成为选择培养分离。通过选择培养能够从自然界混杂的微生物群落中把特定的微生物选择分离出来。 （即人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养，温度，PH等）同时抑制或阻止其他微生物的生长。） （三）举例： 1、要分离耐高温菌，可在 条件下进行培养； 2、要分离对某种抗生素具有抗性的菌种，可在加有 的平板上进行分离； 3、在培养基中加入 ，可以抑制细菌和霉菌的生长； 4、运用将 作为唯一碳源和能源的培养基，可以有效地分离能分解纤维素的细菌； 5、运用无氮培养基（培养基完全不含氮元素）可选择能 的细菌； 6、运用只含 而不含其他氮元素的培养基，可以选择能分解尿素以获取氮的微生物。（能合成脲酶的微生物可以分解尿素）。 知识点三 、观察各种微生物形成的菌落 1、不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落的 、 、 、 、 等，这些可以作为对微生物进行 、 的重要依据。 2、当多种微生物混杂在一起时，根据它们在平板上形成的菌落的 ，可初步将所需的微生物与其他微生物区分开，并在此基础上获得所需微生物的 。 边做边学：以尿素为唯一氮源的土壤微生物的的分离、培养与数量测定 一、基础知识 尿素是一种重要的氮肥，农作物 不能 直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 氨 ，这是因为细菌能合 脲酶 。 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为70-80℃的高温条件淘汰了绝大多数的微生物，使耐热的Taq细菌脱颖而出。实验室中的微生物的筛选，也是应用了同样的原理。 【思考】实验室中微生物的筛选所应用的原理是什么？ 注意：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。 【活动】请小组讨论，合作设计出一种培养基，用于分离出土壤中分解尿素的细菌。 提示：根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。 附培养基的成分： KH2PO4 1.4g NaHPO4 2.1g MgSO4 H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。 【思考】请将你设计的培养基和提供的培养基进行比较，说出该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 【思考】该配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？ 二、统计菌落数目方法 测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。 1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。 先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。一般用于纯培养悬浮液中单细胞菌体的计数。