肺炎支原体培养和药物敏感试验在小儿呼吸道感染疾病中的应用.pdfVIP

2416 中国卫生检验杂志2008年 11月第 18卷 第 11期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Nov2008；Vol18 No11 【经验交流】 肺炎支原体培养和药物敏感试验在小儿呼吸道感染疾病中的应用 陈岳明，张卫英，余道军，吴盛海，卢忠，王贤军 (杭州市第一人民医院，杭州 310006) [关键词] 肺炎支原体 ；大环内酯类；药物敏感试验 [中图分类号】 R375 ．2 [文献标识码] c [文章编号] 1004—8685(2008)1l一2416—02 肺炎是我国儿童常见的疾病，是导致小儿病死的首位原 自中国生物制品鉴定所。分离得到的MP菌株在实验中的终 因，肺炎支原体 (mycoplasmapneumoniae，MP)是其常见病原体 浓度为 10 一10cfu／ml，置37℃，5％CO2培养箱内培养，每日 之一…。MP是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物，没有 观察记录结果至 1—2周，颜色不变即完全不能生长的最低药 细胞壁，专性细胞内寄生，但能在人工培养基上生长。国内最 物浓度为该药物的MIC值。每次实验均各做一组 MPFH的 常用的检测方法是ELISA法和荧光定量聚合酶链反应 (VQ— MIC测定和阴性对照 (只加培养基和药物)。按照美国国家临 PCR)。目前 已有一些肺炎支原体耐大环 内酯类药物 的报 床实验室标准委员会 (NCCLS)2001年规定的标准判定MP对 道 “，使临床有必要开展MP培养及其药物敏感试验，对指 大环内酯类及喹诺酮类抗生素的敏感性 J。 导临床合理用药和流行病学监测有重要意义。我们在2006年 1O月至2008年3月间利用改良Hayflick肉汤培养基 从临床 2 结果 共分离到了112例 MP菌株，并对其进行了体外药物敏感试 2．1 MP感染率 验。 558例呼吸道感染患儿咽拭子经 VQ—PCR检测，有 195 例阳性 ，感染率为34．9％(195／558)，其中引起肺炎 占21．3％ 1 材料和方法 (119／558)。这一结果和黄海辉 报道上海地区≥2岁儿童社 1．1 标本来源 区获得性肺炎的阳性率(26．7％)相近，但明显低于庞保东 ] 所有病例均为2006年 10月至2008年3月间本院儿科门 报道河北地区的儿童社区获得性肺炎阳性率(47％)。 诊和住院病人，共558例。其中男性332例，女性 226例；年龄 2．2 MP培养结果 均在 15岁以下，均数4．1岁。患儿临床症状为咳嗽、发热、气 195例阳性咽拭子用改良Hayflick培养基培养成功 112 喘等，临床诊断为急性支气管炎，肺炎 ，哮喘，扁桃体炎等。标 株 ，成功率占57．4％ (112／195)。根据观察，112例阳性标本 本采集用无菌棉拭子直接擦拭患儿的咽后壁、扁桃体、假膜边 中，培养 1d变为阳性的有57例，占阳性的50．9％(57／112)， 缘后，放回带塞试管送检。标本经 VQ—PCR检测 MPDNA，有 培养2、3、4、5d变为阳性所 占百分 比分别为 l8．8％ (21／ 195例阳性。阳性标本均进行培养。 112)、12．5％(14／112)、12．5(14／112)％、5．3％(6／112)。从 1．2 MP培养 实验结果看 5d就能获得全部阳性结果。 采用改良Hayflick培养基分离临床感染株，培养基包括 2．3 药物敏感试验结果 PPLO肉汤(Difco)，热失活马血清(杭州四季青)，25％酵母浸 标准菌株对 ERY、RXM、JM、CLR、AZM及 C