β-葡萄糖苷酶地研究进展.pdfVIP

13一葡萄糖苷酶的研究进展 孟宪文宋小红陈历俊刘长江北京三元食品股份有限公司 摘要：本文综述了B一葡萄搪苷酶的酶族分类、分布、理化性质、及其水解糖苷机制，以及国内外对B一葡萄糖苷酶 分子生物学研究情况。 关键词：B一葡萄糖苷酶；理化性质；功能 B．葡萄糖苷酶(13．Glucosidase，EC3．2．1．21) 于普通微生物来源的B．葡萄糖苷酶。对于工业应 属于纤维素酶类．是能催化水解芳香基或烃基与糖 用来说。酶的热稳定性越高越有利。对来自嗜热性 基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖的酶。其来源不 和非嗜热性B一葡萄糖苷酶的分析认为，两者在相 同。底物特异性也不同。 互演化过程中的酶修饰作用并不改变酶的活性中心， 1 D一葡萄糖苷酶的酶族分类 也不改变其专一性。只是将酶蛋白结构作部分调整 根据氨基酸序列分类，人们将B．葡萄糖苷酶 以适应高温环境【4】。 划分在糖苷水解酶家族l和3中。家族l中的13．3产B一葡萄糖苷酶的分布 葡萄糖苷酶来源于细菌、植物；家族3中的酶来自 目前已经发现的产B．葡萄糖苷酶的生物类群 真菌、细菌和植物。家族l中的酶除有葡萄糖苷酶 包括原核生物、真核生物。B．葡萄糖苷酶普遍存 活性外。还有很强的半乳糖苷酶活性【l】。 在于植物、微生物和哺乳动物的肠道中。植物中很 根据高级结构的相似性，糖苷酶家族可以被分 多来源的p一葡萄糖苷酶被纯化和研究，这些来源 有植物的种子、果实、叶苗、根和花。微生物有约 成若干部族(Clan)。糖苷水解酶家族l属于‘clan GH．A’(superfamily4／7)．其特点是催化结构域具有 氏黄杆菌(Flavobacterium (B／a)桶状结构，2个羧基氨基酸参与催化反应，菌(Bacillus 作为质子供体和亲核基团。分别位于第4位和第7 位的13折叠上t21。Moracci等通过比较11种糖苷族 (Fusar／um pelta- l的酶氨基酸序列发现．N．E．P．和．Y．I．E．N．两个保 ￡a)、出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)、汉逊德 守序列．并用定点突变的方法证明保守序列中的两 巴利酵母(Debaryomyces 个Glu分别是酸键集团和亲核集团。也有试验通过 ma koningii)、青霉(Penincillium 自杀底物共价修饰和定点突变试验证明这种结论【3】。 黑曲霉(Aspergillus 0一 2 B_葡萄糖苷酶的理化性质 tyzae)、干酪乳杆菌(1actobacilluscasei)等。现在 13．葡萄糖苷酶有胞内酶和胞外酶之分．有些 对真菌中B．葡萄糖苷酶产生菌研究较多的是丝状 生物体内只含有胞内B．葡萄糖苷酶，也有只含胞 真菌，主要为曲霉属和木霉属。而细菌中研究较多 外B．葡萄糖苷酶，但是有少部分微生物体内同时 的是芽孢杆菌属。 含有胞内和胞外B一葡萄糖苷酶。p，葡萄糖苷酶的 4 13-葡萄糖苷酶的结构与功能 相对分子量一般在40～250KD之间。不同来源的 通过X射线晶体衍生法分析出的B．葡萄糖苷 B．葡萄糖苷酶的相对分子量由于其结构和组成不 酶三维空间结构如图1所示。 同而差异很大。大部分p．葡萄糖苷酶的最适pH值 糖苷水解酶家族l的典型结构具有8个 都在酸性范围，并且变化不大，但最适pH值可以 (a／13)结构围成的桶状结构，也被称为4／7超家 超过7．0，而且酸碱耐受性强。B．葡萄糖苷酶的最 族。糖苷水解酶家族3有A区和B区两个域构成， 适温度在30--．110℃之间都有分布，～般来说．来 B区包括SDW序列，内有活性