β-胡萝卜素对X线急性损伤大鼠小肠黏膜结构与屏障功能的影响.pdfVIP

134l 2009全国肠外肠内营养学术会议 B一胡萝卜素对X线急性损伤大鼠小肠黏膜结构 和屏障功能的影响 韩磊1单信芝1马爱国2尚庆军1 (1．青岛大学医学院附属医院，青L岛266003；2．青岛大学医学院营养与 食品卫生研究所，青4266021) 盆、腹腔放疗后常引起放射性肠炎等严重的并发症，这是因为小肠是电离辐射高度敏感器官之 一』11。射线照射后导致肠上皮结构破坏、黏膜溃疡，不但影响食物的消化吸收，还可使肠道内细菌 发生移位，引起肠源性感染，这些并发症又进一步加重放射损伤对机体的危害程度【2】。目前对放射 性肠炎缺乏有效的预防和治疗措施。因此，在进行腹部放射治疗时选择有效的、经济的、易于摄取 的物质以减轻对小肠的损伤，维护其屏障功能对治疗有重要的意义。近年来研究表明谷氨酰胺、表 皮生长因子等对放射性肠炎的治疗有一定的效果，但价格昂贵、摄取不便等问题。D一胡萝卜素 以往研究表明其具有抗辐射、提高免疫功能等作用，本研究通过对腹部辐射损伤大鼠补充p—C，探 讨其对辐照损伤大鼠肠黏膜及肠屏障功能的影响。 l材料与方法 1．1动物和分组清洁级、健康成年雌性SD大鼠40只，由北京维通利华实验动物有限公司提供 为4组：空白对照组(c组)、单纯照射组(R组)、p-C5rag／(kg·d)组(T1组)、p-C10mg／(kg·d)组(T2 组)。每组10只，分笼喂养。pC和花生油由灌胃方式提供，连续灌胃14天，自由进食标准饲料。 氯醛按400mg／kg腹腔注射麻醉，固定于手术板上，以x线直线加速器给予全腹部一次性照射，从剑 75sec。照射后大鼠进代谢笼喂养，第4天处死。 300cGy／min，照射时间1 1．3试剂与仪器 oxidase，DAO)试剂盒(南京建成生 1．3．1试剂p．C(Sigma公司)、二胺氧化酶(diamine 物工程研究所)、内毒素鲎试剂盒(厦门市鲎试剂实验厂有限公司)、花生油(嘉里粮油青岛有限 公司)、3M消毒指示带。 23EXJJn速器并Portal 显微镜(Leica公司)：Qwin图像处理软件；Leica4000B图像分析系统；Wlinac 3K30型)；制冰机(英国M20K型)。 Vision实时影像系统；低温离心机(德国Sigma 1．4观察指标和测定方法 1．4．1一般状况观察大鼠的大便、精神状态、体重变化。 1．4．2血样采集和检测超净工作台上常规消毒，取腹正中切口，腹主动脉取血，注入无热源 35 会H报告论立|1 试管和抗凝管，3000转／mine心Io分钟；使用全白动生化分析仪检ⅢIDAO含量；采用显色基质鲎试 剂终点显色法按照说明书提供的方法测定内毒素浓度。 1．4．3编理组织学屈氏韧带下8～10cm取陡度2cm左右的卒肠，牛理盐水冲洗，福尔马林固定， 酒精脱水，石蜡包埋，切片，H．E染色，光镜下观察。用计算机图像分析仪分别测定3张非连续切片 长”J。对腼黏膜进行绒七和腺体损伤程度分级…。0级：止常绒毛．1级：顶部部分绒七脱落．2级： 绒毛脱落明显，L度与固有层中度分离：3级：绒毛脱落明显，同有层绒毛脱落。 黏腹绒毛和腺体损伤程度分级结果采用卡方检验。应用SPSS11．0统计软件对实验数据进行分析，检 验水准a-4)05，以p≤O05为具有统计学意义，p≤001为具有显著统计学意义。 2结果 T1组1只大鼠在灌胄过程rp形成气管-食管凄不能进食退出实验．R组1只大鼠在腹部照射后死 亡，T2组1只大鼠F来血过程中死亡，其余37只大鼠完成实验。 2 I照射后大鼠一般状抛照射后T】、T2组大鼠精神状态良好，进食、活动好，第3火}l{现了 粘液便，无脓血，大使常规示：部分未消化的食物残清，无n细胞及脂肪滴：潜血试验阿性：R