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【创新设计】2014-2015学年高二生物人教版选修1随堂达标检测:5-2 多聚酶链式反应扩增DNA片段.doc
1.下列关于PCR的描述中,正确的是( )。
①PCR是一种酶促反应 ②引物决定了扩增的特异性
③扩增DNA利用了热变性的原理 ④扩增的对象是氨基酸序列
A.①②④ B.②③④ C.①③④ D.①②③
解析 PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,在高温条件下,把DNA的双链打开,缓慢冷却后,又重新结合,需要耐高温DNA聚合酶,同时,还需要引物,从引物的3′端连接脱氧核苷酸。
答案 D
2.下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中,正确的是( )。
A.以DNA为模板,使DNA子链从5′端延伸到3′端的一种酶
B.Taq DNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加
C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列
D.Taq DNA聚合酶是从深海生态系统中发现的
解析 本题主要考查了DNA聚合酶在PCR技术中的作用及特点。DNA聚合酶不能从头开始催化合成DNA,而只能从DNA单链的3′端延伸子链;Taq DNA聚合酶能耐高温,所以在反应体系中可反复利用,无需另外再添加;PCR扩增的是引物之间的固定长度的DNA序列;Tap DNA聚合酶是1966年从美国黄石公园的一个热泉某种菌体内发现的。
答案 A
3.下图所示为PCR扩增的产物,请分析此产物是哪次循环的产物( )。
A.第一次循环 B.第二次循环
C.第三次循环 D.第四次循环
解析 本题考查PCR的过程。在PCR反应中,以引物为标记,第一次循环时,以加入的DNA为模板,两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸,所以形成的每个DNA中只有一种引物;从第二次循环开始,上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应,所以会形成DNA分子两端均含引物的情况,如下图所示,因此题干中所出现的情况是第一次循环的产物。
答案 A
4.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题。
(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将________的末端称为5′端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。
(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到________,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫________。
(3)PCR的每次循环可以分为________三步。假设在PCR反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有________个这样的DNA片段。
(4)简述PCR技术的主要应用:___________________(要求至少答两项)。
答案 (1)磷酸基团 3′端 (2)耐高温的Taq DNA聚合酶 选择培养基 (3)变性、复性和延伸 32 (4)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等
课堂小结
▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌精诚凝聚 =^_^= 成就梦想 ▁▂▃▄▅▆▇█▉▊▋▌
▃ ▄ ▅ ▆ ▇ █ █ ■ ▓点亮心灯 ~~~///(^v^)\\\~~~ 照亮人生 ▃ ▄ ▅ ▆ ▇ █ █ ■ ▓
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