生物学仪器分析5红外吸收光谱分析.pptVIP

五、红外吸收光谱分析 （一）红外吸收光谱分析 分子内部的能级变化比原子复杂；分子除外层电子的运动状态之外，还有原子核间的相对运动（核间振动）和分子绕中心的转动； 分子能级的层次：电子能级------外层价电子跃迁（1~20eV），对应紫外-可见光区,反映价电子能量状态；振动能级------分子及组成分子的原子的振动（0.05~1eV）， 对应中红外区，反映分子中价键特性；转动能级------分子转动（0.05eV以下），对应远红外区，反映分子的大小，键长等； 较大的能级跃迁时，伴随着较小的能级跃迁，因此，在形成光谱时，较小的能级跃迁形成的谱线叠加在较大的能级跃迁形成的谱线上； 所以，电子光谱包含振动光谱和转动光谱；振动光谱包含转动光谱；  电子光谱对应紫外-可见光区； 振动光谱对应红外光区； 红外吸收光谱实质上是分子振动-转动光谱，它反映分子的振动情况； 当用一定频率的红外光照射某物质的分子时，若该物质分子中的某基团的振动频率与其相对应，此物质就能吸收红外光，产生能级跃迁，形成红外吸收光谱（IR）； 1、 红外光区的划分 红外光是指波长为0.75~1000μm的电磁波，在可见光与微波之间； 根据仪器技术与应用的不同，习惯上又把红外光区分为三个区： 2、 红外吸收光谱产生的两个条件 红外光谱为分子的振动-转动光谱；红外吸收后，发生分子的振动-转动能级跃迁，因此：（1）辐射的光子能量与分子发生振动-转动能级跃迁相等（2）分子的振动必须伴有偶极矩的变化----辐射与分子之间有偶合作用发生，依靠分子偶极矩的变化与红外频率相同来实现电磁振荡与机械振动的偶合； 3、 红外吸收光谱 红外光谱为分子的振动-转动光谱，因此，能级跃迁产生的吸收不是一条谱线，而是许多相隔很近的谱线组成的谱带，具有吸收峰出现的频率范围小，数目多，强度弱，曲线复杂的特点。 红外光谱图是以T-λ曲线或T-σ（波数）曲线，因而吸收峰向下。偶极矩的变化越大，吸收越强；分子极性越大，偶极矩的变化也大，吸收也越强。  红外光谱的吸收强度与相应的摩尔吸收系数大小的划分 （二）分子的振动形式1、双原子分子的振动 由双原子振动方程式可以知道，影响振动频率的直接原因是：*相对原子量（折合）；*化学键的力常数； 2、多原子分子振动的形式 多原子分子原子数目多，组成分子的键或基团不同，空间结构不同，振动形式复杂，因而其振动光谱比双原子分子复杂得多； 把多原子分子复杂的振动分解为许多简单的基本振动------简正振动； 简正振动：分子的质心不变、整体不转动、每个原子都在平衡位置作简谐振动；*伸缩振动---原子沿键轴方向伸缩，键长发生变化，键角不变（有对称伸缩振动和不对称伸缩振动）；*变形振动---基团键角发生周期变化，键长不变（有扭曲、摇摆、剪式之分）； 3、分子振动形式与红外吸收 振动的数目称为振动自由度；每个振动自由度相当于红外光谱图上的一个基频吸收带（峰）； 假设分子由n个原子组成，每个原子有3个自由度；除区整个分子的3个平动和3个转动，因此，分子的振动形式有3n-6种；直线形分子有3n-5种； 但绝大多数化合物在红外光谱图上出现的吸收峰数小于理论计算数，原因是： （1）没有偶极矩变化的振动，没有红外吸收； （2）相同频率的吸收峰发生简并； （3）仪器无法分辨波数相近的振动； （4）有些吸收带的频率范围在仪器的检测范围外； 红外吸收谱带的强度取决于分子振动时偶极矩的变化；偶极矩与分子的对称性有关；振动的对称性越高,振动中分子的偶极矩变化越小,谱带强度也越弱;另外,浓度和溶剂类型也影响吸收。红外活性分子-----有偶极矩变化的分子，能吸收红外辐射；非红外活性分子---没有偶极矩变化的分子，不能吸收红外辐射； （三）红外吸收光谱的基团频率与特征吸收 把代表基团存在，并有较高强度的吸收谱带称为基团频率（特征吸收峰）；官能团区（基频峰）：位于4000~1500 cm-1 区间指纹区（泛频峰）： 位于1500~600 cm-1 区间 （1）官能团区：位于4000~1500cm-1 区间，包括X-H、C=X、C≡X化学键的伸缩振动，是鉴定有机化合物官能团的依据。也叫基团频率区或特征区。比较稀疏,容易辨认。 （2）指纹区：位于1500~600cm-1 区间，包括C-X化学键的伸缩振动和C-H化学键的弯曲振动。这些振动很容易受到邻近化学键振动的影响，分子结构的微小差异对该区的吸收带有明显的改变，与不同的人具有不同的指纹一样；对于指认结构类似的化合物很有帮助。 400