骨髓移植术后巨细胞病毒感染的实验室检测.pdfVIP

生堡撞墼医堂盘壶2Q鲤生!旦筮丝鲞筮』翅垦坠也』!生丛鲤。丛墅2Q鲤。!吐丝：ei旦』 ·581· ．临床实验诊断研究· 骨髓移植术后巨细胞病毒感染的实验室检测 赵宏 范骏张旋陈晓明 胡建华 高海女杨美芳马伟杭 自加世纪50—60年代成功开展同种异体骨髓移植手法检查，即用已知cMV肺炎患者的外周血白细胞作阳性对 术以来，骨髓移植为某些血液系统疾病的治疗带来了新的希 照，以健康人外周血白细胞作阴性对照。光学显微镜下阳性 望。经过半过多世纪的发展，骨髓移植已取得了很大的进 细胞呈棕黄色或棕褐色，阴性细胞呈淡蓝色怛J。IgM和IgG 步，但目前仍然面临着巨大挑战，配型困难、医疗费用高昂和 移植后相关的并发症。其中移植后相关的并发症中，除移植 CMV DNA。具体为从感染组中随机选取5例患者，共计40 物抗宿主的排斥反应外，又以感染巨细胞病毒 份血标本，分离提取血浆后，按试剂盒说明操作提取DNA后 在自动PCR仪上进行扩增。 (cytomegalovirus，CMV)更为重要。CMV感染是威胁移植术 后患者生命的最主要的原因之一，且病死率高…。本研究运 4．CMV抗原血症实验室诊断依据及实验分组：检测外 用不同的方法来检测骨髓移植术后患者外周血中CMV即刻 周血白细胞，计数50000个白细胞，有1个及以上pp65阳 早期抗原(immediateearly 性细胞数或igM阳性即为CMV感染”…。 antigen，rE)、被膜抗原pp65、抗体 IgM、IgC和CMVDNA来比较不同方法反映CMV感染中的 5．统计学分析：采用SPSS15．0软件进行统计学分析。 意义，期望能为移植术后CMV感染患者的早期诊断尽早治 pp65和正在外周血中阳性检出率和检出时间用孟4-s表示， 疗提供参考。 pp65和IE间检出率比较用独立样本t检验，二者检出时间 一、对象与方法 采用配对t检验，P0．05为差异具有统计学意义。 1．对象：2006年1—12月浙江大学附属第一医院骨髓二、结果 移植中心共有42例患者进行骨髓移植，排除骨髓移植前 1．感染组和对照组不同检测方法检测结果：20例骨髓 移植患者移植前CMV CMV抗体16；阴性患者和骨髓移植术后门诊定期规则随访 IgG均为阳性，而p#5、IE和IgM均为 不超过3个月的患者，共有20例患者入选。其中慢性粒细 阴性。感染组移植后3个月内IE抗原阳性患者为16例， 胞白血病5例，急性粒细胞白血病9例，急性淋巴细胞白血 DNA阳 IgM阳性为3例，感染组中随机选取5例患者，CMV 病6例。20例患者男7例，女13例，年龄14—48岁，中位年 性为4例；而对照组中IE抗原阳性为l例，IgM阳性为0例。 龄26岁，根据骨髓移植术后3个月内患者外周血是否出现 17例患者136份外周血标本中，pp65抗原阳性标本为95份 CMV抗原血症分为感染组17例和对照组3例。 2．主要试剂和仪器：鼠抗人单克隆CMV抗体(克隆号 DAB AACl0)，显色试剂为EnVisionTM+System，PeroxidaseDNA阳性为4份(10％)，CMVDNA拷贝数为1．90×103— 1．04×10 (丹麦Dako公司)，光学成像显微镜(OlympusBH-2，日本 7拷贝／ml。4份CMVDNA阳性标本中，其中3份 Olympus公司)，酶标CMV