饲料酶理论应用技术体系之五%3a饲料酶制剂应用效果的评价体系.pdfVIP

首届饲料酶制剂应用技术论坛 暨饲料酶制剂大会 ● 饲料酶理论与应用技术体系之五 ● 饲料酶制剂及其应用效果的评价体系 华南农业大学动物科技学院／冯定远左建军 酶制剂应用效果的评价不像一般的营养成分或添 定的寡糖。而其他分析方法采用的是淀粉或变性淀粉， 加剂那样相对容易。许多时候，即使酶制剂是有效的， 底物结构无法明确。在仅一淀粉酶活力很低的情况 是有针对性的，但未必能够在动物的生产性能中反映 下，需要使用灵敏度更高的底物，如Amylazyme颗 出来。酶在动物日粮中应用更多的是表现出生产性能 指标或试验数据差异不显著，在这种情况下，仅仅用 粉形成凝胶颗粒，然后脱水压模形成的。通过仅一淀 传统的动物生产性能指标(生长增重和饲料报酬)评 粉酶的水解，可溶性的染色淀粉片段释放到溶液中， 价方法并不能完全反映酶的作用及其效果，必须建立 而没有水解的物质可以过滤除去。建立在这种底物基 综合评价体系。一般地，这种评价体系可以考虑包括 础上的分析法可以直接应用于钡4定饲料粘稠液的0【一 如下几个方面：①酶制剂活性的评定；②酶制剂稳定 淀粉酶活力。 性的评定，③酶制剂应用主要生产性能评定，④酶制 1．2Q一半乳糖苷酶活·性的测定 剂应用效果的非常规评定等。 a一半乳糖苷酶作用水解半乳糖一蔗糖形式的寡 糖(棉子糖、水苏糖和毛蕊花糖)产生半乳糖和蔗糖。 1酶制剂活性的评定 。【一半乳糖苷酶的优选底物是P一硝基苯酚一o【一半 1．1 Q一淀粉酶活·眭的测定 乳糖苷(10mM)。对于特定的仅一半乳糖苷酶，水解 0【一淀粉酶的分析通常采用可溶性淀粉作为底物， p一硝基苯酚一o【一半乳糖苷、棉子糖、水苏糖和毛蕊 用DNSA(Bailey，1988)测定还原糖的增加量。谷物 花糖的相对速度以便确证这些酶确实对需要作用的组 中o【一淀粉酶活力的基础是用碘与淀粉或者D一型 分发生作用。o【一半乳糖苷酶水解半乳糖一蔗糖结构 淀粉糊精反应(Sandsted等1939l Farrand，1964)。 的寡糖的活力可以通过Nelson／Somogyi还原糖分析 淀粉水解会导致淀粉与碘产生的紫蓝色下降。经过改 法进行测定。 进的分析o【一淀粉酶活力的方法更简便。比较好的方 1．3蛋白酶活性的测定 法是采用末段为p一硝基苯酚麦芽七糖作为底物(在 用于测定蛋白酶的底物和分析方法有多种，许多 热稳定的0t一葡萄糖苷酶的条件下)，o【一淀粉酶水是用天然蛋白质，如酪蛋白，凝乳蛋白和血红蛋白作 C 解寡糖链，热稳定的o【一葡萄糖苷酶迅速水解硝基 为底物。这种分析方法是基于用三氯乙酸(TA)沉 苯酚寡糖片段，产生葡萄糖和p一硝基苯酚。热稳定 淀未水解的底物，然后在235nm处测定离心获得的上 的葡萄糖苷酶(替代在前面的方法中使用的淀粉葡萄 糖苷酶或酵母麦芽糖酶混合物)能使反应试剂在pH染色标准的或染色交链的蛋白作为底物其专一性更好 5．2～7．5的范围内发挥作用，反应温度可以达到 60C。这种测定分析方法的优点体现在底物是一个确的蛋白质底物。它们包括用磺胺酸染色的白蛋白、酪 4 newfeed2009·靖羽 蛋白和胶原蛋白(azo-白蛋白，azo-酪蛋白和azo-(EC．3．2．1．4)和细菌D一葡聚糖酶(地衣酶，内切 胶原蛋白)，胶原蛋白用灿烂蓝染色。另外有一种广泛 原糖法：采用还原糖法和粘度法，以纯的D一葡聚糖 使用内切蛋白酶底物，称为cowhide苯胺蓝(用灿烂 蓝染色的胶原蛋白)。还有～种以胶原蛋白为基础的底 (从大麦或燕麦中提取)为底物可以直接用来测定B一 物，它是通过染色和交链从鱼