PCR法检测血清I型马立克氏病病毒及其敏感性试验的研究.pdfVIP

维普资讯 确链昭 尸。R纽 弓主竞九扣 扣鸯 声 ro ， ·1O · 生国享盎 童! 生蔓 塑!璺蔓堂!鲤! PCR法检测血清 I型马立克 氏病 ． 病毒及其敏感性试验的研究 宝祥 南(束农业大学动物医学院) 嚣o一 南 ^ 摘 妻 用t尤其与细胞早期感染及病毒侵袭淋巴细 f1 以^工台成的针对血清 I型马立克 氏病病毒 (MDV1) 胞有关 ．可又无直接证据 。以上推测．无疑 A抗原基因(gA)部分序列的两端寡幂棱苷酸为幂台酶链 极大地推动 了对 A抗原基 因的深入研究 。日 反斑 (PCR)的引物 ·分别对马立克氏病病毒血清 I型(京-1 本的 Kato等 6【’研究认为．在 HVT核昔酸序 株，MDll／7~C株)F21tI(SB-1株){3型(火鸡疱疹病毒的 列中．也同时存在着类似 MDV1 的两个开 FC126株)毒株和 GA株 BamHIB片段的PACY184克隆 放性阅读框架 (ORFs．其 中ORF ，主要编码 重组质粒DNA进行基因扩增反应及其敏感性试验．结果 表 明t该引物不仅对 MDV1具有较强的特异性一而 目由此 糖蛋 白A 即A抗原，ORF：所编码蛋 白质的 引物引导下的PCR可检测出l～l0个质粒分子和 1×10 性质有待鉴定)．它们 几乎与 MDVlORFs 咋、细胞中的一十感染细胞．因此一我们推论 该法舵适用于 的定位一致 ．且彼此 间序列的同源程度高于 马克氏病(MD)临床府料和样本的棉铡 68 。事实上 ，通过计算机对MDVl和HVT 马立克氏病 (MD)是一种具有高度传染 A 抗原基因序列的比较．发现除存在上述所 性、淋 巴组织增生性疾病 ，其致病因子属疱疹 谓高度 同源序列外．仍有小部分序列问的同 病 毒科 的一个 成员—— 马立 克 氏病 病 毒 源程度至少低于45 鉴于此，我们选择 ， (MDV)。早先，据致病性和血清学反应不同 MDV1A抗原基因中450bp~8J6bp一段扳 将 MDV相关疱疹病毒划分为三个不同血清 为保守 的区域 为目的片段 t试 图借助 PCR 型：血清 1型(MDV1)包括引起高发性 内脏 特异性 基因扩增法来鉴别 MDV1毒株 与疫 或神经肿瘤的强毒株 (Md+)及其传代后失 苗株 ·从而 为 MD临床确诊提供 可靠 的依 去致病性和致瘤性的弱毒变异株 (Md一)；血 据 。 清 2型 (MDV2)为非致病性 的 自然弱毒株P 1 材料和方法 血清3型 (MDV3)为用作疫苗的火鸡疱疹病 毒(HVT)，亦无致病性 l·1 细胞和病毒：．分别用京一1株 ．f中国兽 近 20多年来，随着免疫学和分子生物学 药监察昕提供)和 SB