蜂蜡素降低血浆胆固醇作用机制初步研究.pdfVIP

表5．藿香正气滴丸对硫酸镁所致泻下小鼠的影响 n=10 与模型组比较杈O．05·+po．Ol与对照组比较66po．01A△6p0．001 3结论 藿香正气滴丸为一治疗胃肠型感冒的药物，本试验结果显示，藿香正气滴丸可显著延长 硫酸铜所致家鸽呕吐潜伏期，减少呕吐次数；促进小鼠胃排空；抑制硫酸镁所致小鼠肠运动 功能的增强；延长硫酸镁所致泻下小鼠排黑便潜伏期、减少排便粒数，证明该药物确有显著 的镇吐、止泻和调节胃肠功能的作用，可较好缓解胃肠型感冒的呕吐、胃肠不适及泻泄症状。 参考文献 1 徐叔云，卞如濂．陈修．药理实验方法学叫】．北京人民卫生出版枕2001 2 陈奇．中药药理实验方法学Dn人民卫生出版社，1993 蜂蜡素降低血浆胆固醇作用机制初步研究 杨丽，张小娜 广州白云山化学药创新中心药理室，广东广州510515 【摘要】目的探讨蜂蜡素降低血浆胆固醇作用机制。方法采用体外HepG2细胞培养，以放 射性标记物14c-乙酸、砸20和3H一甲羟戊酸研究蜂蜡素对胆固醇生物合成步骤的影响，以 的含量。结果蜂蜡素呈剂量依赖性抑制14C．乙酸、札。掺入细胞胆固醇生物合成，而对3II 一甲羟戊酸掺入合成无影响；在细胞微粒体提取物中加入蜂蜡紊和14C-HMG-CoA孵育，对 217 平，同时加入蜂蜡索和14c．HMG．CoA孵育，可使甲羟戊酸生成减少。结论蜂蜡素抑制胆 固醇生物合成，是从乙酸消耗到甲羟戊酸生成之间某一酶催化水平上，与HMG-CoA还原酶 有关。蜂蜡素对HMG--CoA还原酶无直接抑制作用，但可通过抑制HMG--CoA还原酶上 调而抑制其活性，提示蜂蜡索降低血浆胆固醇的作用点可能在对该酶的合成或降解上。 关键词：蜂蜡素：胆固醇；HMG-CoA还原酶：液体闪烁计数 蜂蜡索是广州白云山制药股份有限公司近年研制并已批准上市的国家二类新型调脂中 药。蜂蜡素是由蜂蜡经皂化、分离、提取得到的一种白色或类白色蜡质粉末，为天然高级烷 醇混合物，其中以含有三十烷醇(64．78％)和二十八烷醇(14．76％)为主l¨。大量的药理、 毒理和临床研究已经证明，蜂蜡紊能明显降低血清TC、U)L—C及升高HDL-C，不良反应轻 微且发生率极低，是治疗II型高胆固醇血症安全、有效的药物嘲。但蜂蜡素降低血浆胆固醇 作用机理至今尚未明了。本研究旨在初步探讨蜂蜡素降低血浆胆固醇作用机制，采用体外 HcpG2细胞培养及液体闪烁计数法，并以洛伐他汀为阳性对照药研究蜂蜡紊对胆固醇生物合 成途径的影响，以初步分析蜂蜡素降低血浆胆固醇的作用位点，为临床合理应用提供理论依 据。 I实验材料 胞，7402)(中山大学基础医学院实验动物中心) 1．1细胞株人肝癌细胞(HepG2 1．2药物和试荆蜂蜡素由广州白云山制药总厂提供；洛伐他汀购自中国药品生物制品鉴 脱脂血清(LPDS)由广东省人民医院自制：B哟96、葡莓糖．6．磷酸脱氢酶购自美国Sigma 团化学试剂有限公司；1务双一2一(5．苯基恶唑基)苯(POPOP)购自上海试剂～厂． 细胞蛋白质含量测定试剂： 试剂甲：将50 水至500ml中溶解；溶液B：取0．59CuS04．5H20加双蒸水至100ml溶解； 份溶液A与l份溶液B混合而得：试剂乙：将l份Folin-酚试剂与一份双蒸水混合而得。 218 752C型紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂)。 2实验方法 2．1细胞培养将人HepG2细胞放置在75cm2t拘培养瓶中，加入适量的RPMll640培养液培 C02、37C及饱和湿度培养箱中培养。待细胞生长融合达70-80％时，用0．05％胰蛋白酶消 化细胞进行常规传代培养或接种于培养板中进行药物测试。 影响‘3一铂 2．1．1实验分组 -4,8xlO一、8×10～、8xlO-1和8×1005个剂量组；(3)蜂蜡素8x10～、8x10～、 ug．mrl 8×10～、8xlOo和8×101ug．ml。15个剂量组。上述剂量均为药物终浓度。 2．1．2胆圃醇提取和测定HepG2